學位論文

Permanent URI for this collectionhttp://rportal.lib.ntnu.edu.tw/handle/20.500.12235/73899

Browse

Subject: search.filters.subject.betalamic acid

Search Results

Now showing 1 - 2 of 2
  • No Thumbnail Available
    Item
    利用酵素連續催化顯色反應偵測酪胺酸及酪胺酸酶活性
    (2020) 陳慧瑜; Chen, Huei-Yu
    酪胺酸是一種芳香族胺基酸，是合成兒茶酚胺類和黑色素的重要前驅物。酪胺酸的代謝紊亂可能會導致生物流體中的酪胺酸濃度水平異常，故酪胺酸為檢測疾病的重要生物標記物。酪胺酸酶是一種含銅氧化酶，在酪胺酸代謝生成黑色素的路徑中，酪胺酸酶是重要的限速酶，而酪胺酸酶的異常表達，也可能造成黑色素瘤癌等疾病，因此能利用簡單的方法偵測酪胺酸及酪胺酸酶活性，具有重要意義。在這項研究中，我們開發了酵素連續催化之比色法生物感測器，利用酪胺酸在酪胺酸酶和4,5-多巴雙加氧酶 (DOD) 的催化反應下，所生成的黃色甜菜醛胺酸和具有紅螢光的甜菜色素作為輸出訊號，選擇性偵測酪胺酸及酪胺酸酶活性。本實驗所開發出的系統對酪胺酸及酪胺酸酶濃度具有良好的線性關係 (酪胺酸：R=0.998；酪胺酸酶：R=0.994) 及偵測極限 (酪胺酸：1.102 μM；酪胺酸酶：0.072 U/mL)，也成功利用標準添加法應用於偵測真實樣品胎牛血清及人工尿液中的酪胺酸和酪胺酸酶活性，且得到良好的準確性。此外，透過麴酸作為抑制劑模型測試，證實此感測器也可應用於篩選出酪胺酸酶的潛在抑制劑。
  • No Thumbnail Available
    Item
    開發大腸桿菌之雙訊號多巴胺全細胞生物感測器
    (2017) 林于寬; Lin, Yu-Kuan
    多巴胺為一兒茶酚胺類之神經傳導物質且在人體中扮演著不可或缺的角色，而不正常的多巴胺濃度會導致一些疾病的產生，如：帕金森氏症以及亨丁頓舞蹈症。因此檢測多巴胺是一門很重要的課題。我們設計了一組感測多巴胺之大腸桿菌全細胞生物感測器，運用大腸桿菌中單胺類調控組作為感測機制，並以紅色螢光蛋白作為訊號來源，針對多巴胺濃度能夠有良好的相關係數以及偵測極限 (1.43M)，且將紅色螢光蛋白置換為紫茉莉之4,5-多巴雙加氧酶 (MjDOD)，4,5-多巴雙加氧酶能將左旋多巴轉換為甜菜醛胺酸 (具有432nm特徵吸收峰，為甜菜黃色素之前驅物)，推測多巴胺也能透過4,5-多巴雙加氧酶催化而形成同樣具有432nm特徵吸收峰的6-去羧基甜菜醛胺酸，置換4,5-多巴雙加氧酶後在偵測多巴胺以及左旋多巴時，同時具有相當不錯的相關係數以及偵測極限，也經由酵素的置換，我們成功地消除了苯乙胺以及苯乙醛的干擾。最後我們結合紅色螢光蛋白以及4,5-多巴雙加氧酶，設計出足以區分苯乙胺、多巴胺、左旋多巴以及腎上腺素等四種類似物，透過偵測紅色螢光以及432nm特徵吸收峰，這四種類似物的訊號消長不盡相同，因此可以製作其特徵訊號圖譜。此生物感測器有著相當不錯的偵測極限以及區分多巴胺類似物的特性，在未來偵測與多巴胺相關的疾病能夠更加精準且有效。