學位論文
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Item 以液相層析串聯式質譜技術檢測蜂王乳中的單、雙、三磷酸腺苷化合物(2018) 廖琬柔; Liao, Wan-Rou核苷酸化合物由含氮鹼基、核糖和磷酸基團所組成,以腺嘌呤(Adenine, Ade)所組成的三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)、二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate, ADP)、單磷酸腺苷(Adenosine monophosphate, AMP),在生理機能中扮演重要的角色。蜂王乳(Royal Jelly)為蜂巢中工蜂上顎腺(Mandibular gland)以及咽下腺(Hypopharyngeal gland)的分泌物,富含多種純天然成分,更有研究指出蜂王乳可提供人體所需之營養。本實驗以此為出發點,開發一種可靠且準確的方法,檢測蜂王乳中的核苷酸含量,並探討二日齡和三日齡蜂王乳的含量差異。由於蜂王乳為複雜的基質樣品,為了準確定量蜂王乳中的Ade、AMP、ADP和ATP含量,本實驗開發快速且有效的固相萃取法(Solid-Phase Extraction, SPE)以及分散式固相萃取法(Dispersive Solid-Phase Extraction, dSPE)兩種前處理方法,並優化參數以達到最佳的萃取效率。本實驗的分析方法,使用cyanopropryl (-CN)管柱搭配四元流動幫浦,藉由改變層析環境之pH值,使分析物在12分鐘內達到良好的分離,再結合串聯式質譜進行檢測。本實驗所開發的分析方法有良好的精確度(RSD%< 10.5%)與準確度(回收率81.3 - 118.4%),線性範圍在2.5 - 1000 ng/mL之間,相關係數皆在r = 0.9995以上,偵測極限(LOD)和定量極限(LOQ)最低分別可達1.0 ng / mL和2.5 ng / mL。應用分散式固相萃取法搭配液相層析串聯式質譜法,成功定量蜂王乳中的核苷酸含量(6.2 - 2126.0 mg/kg),二日齡與三日齡蜂王乳的核苷酸含量並無顯著差異。