學位論文

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    利用螢光奈米鑽石做生物標記的開發與應用
    (2011) 張璧名; Be-Ming Chang
    生物研究上,螢光標記是常用的研究方法之一,但常用的螢光標記物 質,如有機螢光染劑、量子點等有光漂白的問題或是具生物毒性而影響生物活性, 這些都會降低研究結果的準確性。相較而言,螢光奈米鑽石能永久維持螢光性質 並具有非常好的生物相容性,沒有量子點會光閃爍而不利於觀察的缺點,在生物 標記上也能做長期及連續的追蹤,因此做為生物標記的工具極具潛力。然而螢光 奈米鑽石在生物研究常用的緩衝溶液中容易聚集 (agglomeration) 的問題,讓 生物標記無法成功達到專一性及良好的影像解析。因此本篇利用白蛋白(albumin protein) 以簡易吸附的方式修飾到螢光奈米鑽石表面上,避免螢光奈米鑽石聚 集的問題,且證明能長時間在生物緩衝溶液 (Phosphate buffered saline, PBS) 中維持良好的懸浮性。 再者,本實驗利用懸浮性良好的螢光奈米鑽石 (albumin-FND)表面的白 蛋白之胺基 (amine group) 位置,將生物素 (biotin) 分子共價鍵結在白蛋白 上成為我們的標記探針 (biotin-albumin conjugated FND)。而我們將具有生物 素分子的 CD44 抗體或霍亂毒素次單元 B 在辨認細胞表面專一性的位置後,利用 卵白素 (streptavidin protein) 與生物素之間極高的親和性來與標記探針 (biotin-albumin conjugated FND) 做連接,並成功得到專一性的螢光標記及良 好的螢光解析。