中藥材板藍根及大青葉之成分分析與基原辨識

Abstract

高效液相層析儀（HPLC）為測定中藥指標成分的常用分析工具，而近年來高效液相層析質譜儀（LC-MS）的發展，亦使其在天然藥物分析上逐漸扮演重要角色。本研究利用HPLC配合柱前衍生化方式，分析板藍根及大青葉藥材中的10個胺基酸成分，利用LC-MS偵測10個有機酸類及其他藥理活性成分，並開發一HPLC分析方法，建立各品種之化學指紋圖譜。另外誘導偶合電漿質譜儀（ICP-MS），是目前用於無機元素分析的主要方法，本研究亦利用ICP-MS，對板藍根及大青葉藥材中的水溶性無機元素進行分析，並應用於藥材基原之化學辨識。

本研究分為三個部份，第一部份為藥理活性成分分析，板藍根及大青葉為常用之清熱解毒藥材，而中藥材的清熱解毒功效，主要集中於其活性成分的抗菌及抗內毒素作用，在板藍根及大青葉中以胺基酸類及有機酸類成分為主。胺基酸類採用柱前衍生化方式，以DNFB（2,4-dinitrofluorobenzene）為衍生試劑配合HPLC進行分析，可於60分鐘內成功分離板藍根及大青葉中10種主要的胺基酸成分（Asp, Ser, Glu, Gly, Pro, Arg, γAB, Trp, Val, Tyr ）。有機酸及其他藥理活性成分則以HPLC-MS進行分析，採用SIM模式，可於60分鐘內偵測10種藥理活性成分（adenosine, indican, vanillic acid, syringic acid, anthranilic acid, salicylic acid, benzoic acid, tryptanthrin, indigo, indirubin）。上述分析方法亦使用於板藍根及大青葉加工製品，如板藍根濃縮顆粒及青黛。

第二部份為各品種之指紋圖譜建立，板藍根及大青葉市售品種混雜，除《中華人民共和國藥典》所收載之十字花科植物菘藍（Isatis indigotica Fort.）的根（板藍根）、葉（大青葉），及爵床科植物馬藍（Baphicacanthus cusia Bremek.）的根、莖、根莖（南板藍根）及葉（南板藍葉）外，另有來自豆科野木藍（Indigofera suffruticosa Miller.）、馬鞭草科大青（Clerodendrum cyrtophyllum Turcz.）等數種植物的代用品。本研究開發一HPLC分析方法，以32個吸收峰作為基原辨識的依據，建立化學指紋圖譜。

第三部份為水溶性無機元素分析，利用ICP-MS，進行板藍根及大青葉藥材中水溶性無機元素之定量及半定量分析，並應用於藥材基原之化學辨識。而基原辨識方面，除採人工方式分類外，亦配合使用多變量統計軟體如SPSS、HCE等，進行區別分析、主成分分析及群聚分析，其結果可作為中藥材基原辨識及品質控管的參考。