生命科學專業學院—生命科學系
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本系學士班之教育目標為「培育優良之生物科教師及生命科學研究人才」雙軌並行。
因應少子化的衝擊,本系調整相關員額及教學資源之分配,在課程設計及學習活動上,特別注重學生基礎學識、研究能力和研究方法的訓練,使學生可依個人志趣作學習規劃,畢業後有更寬廣的出路。
本系碩、博士班之教育目標則以「培養生命科學研究人才」為主,並兼顧師資培育,故課程設計及學習活動以培養獨立研究能力為主要目標。
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Item 探討三氟敏 (Trifloxystrobin) 對斑馬魚胚胎離子調節、循環系統和感覺行為之影響(2024) 高悅慈; Kao, Yueh-Tzu三氟敏是一種被廣泛使用的甲氧基丙烯酸酯類除真菌劑。在三氟敏的過度使用下,已有研究證明其在環境中的殘留及對水生生物的風險。為了全面了解三氟敏對非目標生物的毒性作用及機制,本研究選擇斑馬魚作為實驗動物,探討其對胚胎之致死性、離子調節功能、感覺系統、循環系統及基因表達的影響。實驗將受精後4小時的胚胎暴露於0、100、200和300 ppb的三氟敏溶液中,持續96或120小時。結果顯示,濃度高於200 ppb會降低胚胎存活率和孵化率。同時,離子細胞數量及胚胎體內的Na+、K+和Ca2+水平顯著減少,表明其對離子調節功能產生了負面影響。在循環系統,除了圍心腔水腫、和心率降低,還造成了心室收縮力增加、心室血液逆流和血流流速變慢等心血管損傷。此外,本研究還揭示了三氟敏的感覺系統毒性,其不僅導致側線毛細胞數量減少,眼睛、耳石和耳石囊變小,通過行為反應實驗,還證實了側線感覺、聽覺、視覺和嗅覺功能亦受到損害。綜上所述,本研究闡明了三氟敏對斑馬魚胚胎的多種毒性作用,並透過RNA定序,從基因層面對其可能機制進行探討。Item 聚苯乙烯奈米塑膠對斑馬魚 (Danio rerio) 胚胎的影響(2022) 甘富信; Kantha, Phunsin塑料是日常生活中使用最廣泛的材料,疏忽的垃圾管理導致環境中的數量不斷增加。值得注意的是,納米塑料(NPs; 直徑從 5 到 100 納米的微小塑料碎片)難以追踪,並已成為 21 世紀的主要污染源。聚苯乙烯 (PS) 是環境中最普遍的納米塑料之一。在實驗室中,PS-NPs 已被證明可以穿透皮膚並積聚在魚胚胎的器官中。然而,人們對 PS-NPs 對魚胚胎皮膚功能(如離子調節和側線感覺)的潛在影響知之甚少。在本研究中,斑馬魚胚胎被用作動物模型來探索 PS-NPs 可能對魚胚胎造成的毒性作用。在本研究的第一部分,斑馬魚胚胎暴露於三種不同大小的 PS-NP(25、75 和 200 nm)中 96 小時或 120 小時。分析了幾類毒性終點,包括發育形態(體長、身體彎曲、體節長度、眼睛大小、心包腔大小和卵黃囊大小)、身體活動(運動活動、視運動反應和強硬誘發反應)和側線感覺(毛細胞數量和形態)。此外,還檢測了神經標記基因(ache、syn2a 和 mbp)和眼睛發育基因(pax6a, pax6b, otx2, 和 rx1)的 mRNA 表達。結果表明,50 mg/L 的 25 nm PS-NPs 在所有的毒性終點均引起顯著的不良反應,表明胚胎發育遲緩和異常,身體活動和感覺毛細胞也顯著受損。在 25 mg/L 的 25 nm PS-NPs 下,只有身體活動和毛細胞顯著受損。在 10 mg/L 的 25 nm PS-NPs 和 75 和 200 nm PS-NPs 的所有濃度下,大多數毒性終點的影響是不顯著的。在本研究的第二部分,斑馬魚胚胎暴露於 25 nm PS-NPs 96 小時,以測試 PS-NPs 對皮膚細胞(離子細胞和角質細胞)離子調節功能的影響。暴露於50 mg/L PS-NPs後,胚胎皮膚細胞的離子(Na+、K+和Ca2+)含量和酸/氨排泄量顯著下降。皮膚角質形成細胞的頂端結構在 10、25 和 50 mg/L 時受損。離子細胞的數量和線粒體活性在 25 和 50 mg/L 時降低。 CellROX 染色顯示的活性氧 (ROS) 水平顯示離子細胞和角質形成細胞都處於氧化壓力狀態。 PS-NPs 降低了抗氧化基因(sod1、sod2、cat 和 gpx1a)的 mRNA 表達,並促進了細胞凋亡相關基因(casp3a)。綜上所述,本研究表明 PS-NPs 可能抑制抗氧化反應並誘導氧化應激,導致線粒體損傷和離子細胞死亡,最終損害皮膚功能,包括離子攝取、pH 調節和氨排泄。本研究揭示了 PS-NPs 可能對魚胚胎造成的潛在風險以及 PS-NPs 可能從分子和細胞到個體水平的毒理學機制。Item 利用斑馬魚胚胎模式研究烯酸酯類殺菌劑pyraclostrobin 之毒性(2023) 葉凡瑄; Yeh, Fan-Hsuan百克敏(pyraclostrobin)是一種被大量使用的農業除真菌劑,透過地表徑流等途徑汙染環境,在世界各地的水域已被檢出。其對於水生生物包括魚類以及兩棲類,具有極高的非專一毒性。先前研究證實百克敏對於斑馬魚具有粒線體毒性、心毒性並造成發育延遲、增加氧化壓力、降低活動力。但對魚類其他生理功能的影響仍不清楚。本研究利用斑馬魚胚胎作爲毒理模式,將其曝露於100-1000 ppb的百克敏96小時後,觀察其對於基因表現、離子調節、側線感覺功能的變化;曝露百克敏120小時後,觀察聽覺與視覺行爲的改變。並利用轉基因螢光魚觀察中樞神經系統的影響。結果顯示百克敏96小時半致死濃度為204.6 ppb。濃度≥100 ppb 造成心率下降、側線毛細胞損傷、觸碰逃跑速度下降;濃度≥150 ppb造成體長降低,眼睛、耳石囊、耳石面積變小,卵黃消耗減少,體内Ca2+、K+離子含量下降,離子細胞數目減少;濃度200 ppb造成圍心腔水腫、皮膚幹細胞減少以及側線毛細胞減少。利用RNA定序分析基因表現發現許多異常包括:離子調節(atp1a1a, atp2b,atp6v, kcnj1a, rhcg)、側線感覺(cib2, myo6b, s100)、粒線體電子傳遞鏈(cytb, cox3、cox19)、內耳感覺(otomp, cep290, oc90)、視覺(cabp5a, clcc1)、細胞凋亡(casp3, casp8, casp17)等相關基因。在行為實驗發現,百克敏會降低聲音驚嚇反應之敏感度,並延長視覺運動反應時間。螢光魚的結果顯示,百克敏會造成脊髓運動神經元減少。綜上所述,本研究提出百克敏可能會造成魚類離子調節、周邊感覺(側線、視覺、聽覺)以及中樞神經異常,對魚類生存造成威脅,需更審慎評估百克敏的使用。Item 以斑馬魚為模式調查環境酸化與鉑類化療藥物對毛細胞與離子細胞的影響(2019) 洪君儀; Hung, Giun-Yi淡水生態系統的酸化已被認為是全球性的環境問題,並導致魚類行為的變化。然而,酸性環境是否造成淡水魚側線系統的功能改變仍然是未知的。此外,許多研究揭露藥物汙染水環境的事實,其中包括抗癌化療藥物。然而這些藥物造成的環境作用、環境影響的程度與廣度鮮為人知。本研究目的在於檢視斑馬魚胚胎暴露於酸性或鹼性淡水時,是否改變了神經丘毛細胞的表達和功能。並藉由決定鉑類化療藥物(順鉑)對於表皮離子細胞與毛細胞產生影響之最小濃度,了解順鉑之亞致死效應,以應用於鉑類藥物造成水環境影響之早期風險評估。將斑馬魚胚胎暴露於不同的酸鹼pH值環境中,分析長期暴露(受精後0~96小時)與短期暴露(受精後48~96小時)對胚胎形態與側線毛細胞功能之影響。另外,將斑馬魚胚胎受精後長期暴露於不同濃度的順鉑後,分析胚胎形態、存活率、體長、及魚體的離子(鈉、氯、鈣)與鉑含量。功能分析方面,利用掃描式離子選擇電極,分析側線毛細胞功能(機械傳導通道鈣離子流)與皮膚離子細胞排酸功能。結果顯示,長期暴露於pH5條件下,側線毛細胞數量與功能皆下降。短期暴露於pH5條件下,僅毛細胞功能下降,然而毛細胞數目不變。進一步利用morpholino oligonucleotides進行基因減弱,降低H+-ATPase與 gcm2 表現,使得調節酸鹼平衡機制受損後,發現胚胎毛細胞數量與功能皆下降。此外,胚胎長期暴露於濃度由低至高的順鉑中,毛細胞功能最先受損(濃度1 µM)、隨後是毛細胞數與魚體氯離子含量下降(濃度10 µM)、離子細胞排酸能力下降及魚體鈉與鈣離子含量下降(濃度50 µM)、體長與離子細胞密度下降(100 µM)、最後是存活率下降(濃度500 µM)。研究結果顯示酸性環境會導致神經丘毛細胞功能受損。對於順鉑引起之毒性,毛細胞明顯比離子細胞更敏感。本研究利用掃描式離子選擇電極偵測毛細胞與離子細胞功能之改變,決定順鉑最低影響濃度,此法有高達500倍相較於偵測存活率變化之敏感度,未來可應用於偵測鉑類藥物對於水環境造成之早期風險評估。Item 汞對於斑馬魚仔魚側線感覺與離子調節功能之影響(2018) 潘予芹; Pan, Yu-Chin汞(Hg)是一種具高毒性的重金屬,非常容易藉由生物累積的方式進入食物鏈。其毒性取決於他的化學結構、接觸途徑以及物種,目前已有許多在人體及哺乳類動物實驗中,證明長期暴露在汞確實會造成損傷,即使是在低濃度下仍有極高的風險。先前對於汞造成斑馬魚影響的研究相當多,主題大多著重在汞對於斑馬魚胚胎時期神經與腦部發育的影響,較少去探討孵化後仔魚暴露在含汞的環境下,其皮表的離子細胞以及毛細胞的影響。本實驗利用斑馬魚仔魚作為模式物種,分別暴露於短時間(4 hrs)與長時間(48 hrs)含汞(氯化汞、甲基汞)的水體當中,觀察仔魚表皮的毛細胞與離子細胞;這兩型細胞分別負責機械性感受器的功能、排酸功能。短時間暴露於氯化汞和甲基汞後,導致仔魚表皮之毛細胞與離子細胞的細胞數目與功能下降;進而觀察到仔魚逆流行為、活動力以及體內鈣和鈉含量下降。長時間暴露後,於較低的濃度即可觀察到汞所造成的影響,包括細胞數目與功能的下降、逆流行為、體內離子含量及基因表現量的改變。另外,於本實驗我們也觀察到氯化汞與甲基汞所造成的毒性不盡相同。