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Item 系統農藥芬普尼對斑馬魚神經系統的影響(2020) 徐代軒; Hsu, Tai-Hsuan芬普尼 (fipronil) 是一種苯基吡唑類殺蟲劑，可選擇性抑制昆蟲中的γ-氨基丁酸（GABA）受體。儘管芬普尼已成為在水生環境中使用最廣泛的藥物，但很少有研究評估芬普尼的神經毒性對於水生脊椎動物的感覺和運動系統的影響。在本碩士論文的研究中，我們選擇斑馬魚（Danio rerio）實驗動物來探討芬普尼對感覺與運動系統的神經毒理作用。我們評估了急性芬普尼暴露對斑馬魚存活率，側線毛細胞數量以及神經毒性的影響，此外，我們比較了正常與芬普尼處理下斑馬魚的游泳軌跡熱圖、速度和距離的差異。我們的實驗結果發現成年斑馬魚暴露在0.5、1.0和2.0 ppm芬普尼的水中環境24小時，與正常處理斑馬魚比較，存活率隨著芬普尼濃度顯著遞減。而斑馬魚胚胎暴露在0.1、0.5和1.0 ppm芬普尼的水中環境24小時，與正常處理斑馬魚比較，側線毛細胞數量也是隨著芬普尼濃度顯著遞減。透過組織病理學和西方墨點法研究發現，成年斑馬魚暴露於1.0 ppm芬普尼的水中環境24小時，大腦組織的氧化壓力、發炎與細胞凋亡，與正常處理斑馬魚比較，則是顯著增加。通過影像追蹤觀察，成年斑馬魚暴露在0.1和0.5 ppm芬普尼的水中環境24小時，游泳軌跡的速度和距離隨著芬普尼濃度顯著遞減，儘管芬普尼的神經毒性主要針對無脊椎動物昆蟲的GABA受體而開發，但我們的研究結果發現，芬普尼不但會減低斑馬魚的存活率，還會透過損傷側線的毛細胞數量以及產生氧化壓力、發炎與細胞凋亡來損傷大腦組織來影響斑馬魚的感覺和運動系統。這結果推論系統農藥芬普尼誘導的神經毒性會損傷水生脊椎動物的感覺與運動系統。Item 天然植化素槲皮素與蘿蔔硫素對糖尿病大鼠的泌尿系統保護機轉(2020) 林嘉發; Lin, Chia-Fa本論文主要在探討天然植化素（phytochemicals）對於糖尿病大鼠的泌尿系統保護作用，並研究有關細胞凋亡（apoptosis）、細胞自噬（autophagy）、發炎性細胞凋亡（pyroptosis），和粒線體功能的作用機轉。我們建立了兩種不同誘發糖尿病的動物模型，第II型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus, T2DM）模型，與第I型糖尿病（Type I diabetes mellitus, T1DM）模型。T2DM模型主要研究對象是第II型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus, T2DM）之腎臟細胞損傷與保護，而T1DM模型則是用於研究糖尿病的排尿功能障礙，這通常會發生在較嚴重的T1DM高血糖狀態，因為T1DM模型可以快速誘導糖尿病膀胱（diabetic bladder）損傷。 我們萃取富含槲皮素（quercetin）的番石榴汁，並混合不同比例的海藻糖（trehalose），來研究其對於T2DM大鼠腎臟和胰臟損傷的保護作用，並採用高效液相色譜分析法以測定番石榴汁的有效成分。通過腹腔注射菸鹼醯胺（nicotinamide）和鏈脲佐菌素（streptozocin），結合高果糖飲食誘導Wistar大鼠T2DM模型，持續8周。用不同劑量的番石榴汁混和海藻糖餵養大鼠4周，檢測口服葡萄糖耐量試驗（Oral Glucose Tolerance Test, OGTT）、血漿胰島素（insulin）、糖化血色素（glycated hemoglobin, HbA1c）、胰島素抗性指數（Homeostasis Model Assessment-Insulin Resistance index, HOMA-IR）、β細胞功能和胰島素分泌指數（Homeostasis Model Assessment of β-cell function, HOMA-β）。我們也使用了免疫組織化學染色法、螢光染色法和西方墨點法來測定氧化和發炎程度，用化學發光分析儀測定了血清和腎組織活性氧類（Reactive Oxygen Species, ROS）濃度。 結果發現，番石榴汁中高含量的槲皮素對過氧化氫（Hydrogen Peroxide, H2O2）和次氯酸（hypochlorous acid, HOCl）有清除作用，而海藻糖對H2O2有選擇性清除作用，而對HOCl無清除作用。對於T2DM的OGTT、insulin、HbA1c、HOMA-IR和HOMA-β水平均有影響，而番石榴混和海藻糖對T2DM改變的參數，除HbA1c外均有顯著改善。番石榴汁混和海藻糖能顯著降低T2DM所增強的腎臟ROS、4-hydroxynonenal、caspase-3/apoptosis、LC3-B/autophagy，以及 IL-1β/pyroptosis的水平。研究結果顯示：番石榴汁混和海藻糖的攝取，對於因T2DM而損傷的胰臟和腎臟細胞，具有顯著的保護作用。 嚴重的高血糖能誘發氧化壓力，造成糖尿病膀胱（diabetic bladder）,進而引發排尿功能障礙。我們在論文中探討了蘿蔔硫素（sulforaphane），一種具有抗氧化力的轉錄因子Nuclear factor erythroid 2-related factor 2（Nrf2）激活劑，是否具有預防糖尿病因高血糖而併發膀胱功能障礙的功用。糖尿病誘導前給予鏈脲佐菌素和蘿蔔硫素，用化學發光分析儀測定膀胱活性氧類，另用西方墨點法檢測粒線體功能、粒線體Bcl-2-associated X protein（Bax）和胞漿細胞色素cytochrome c、抗氧化防禦能力Nuclear factor erythroid 2-related factor 2／heme oxygenase-1（Nrf2/HO-1）、內質網壓力標誌物Activating transcription factor 6／C/EBP Homologous Protein（ATF-6/CHOP）和Caspase 3／poly ADP-ribose polymerase （Caspase 3/PARP）。糖尿病增加膀胱組織中Keap1的表現，並降低Nrf2的表現，與膀胱活性氧增加、粒線體Bax轉位、胞漿細胞色素（cytochrome c）釋放、ATF-6/CHOP、Caspase 3/PARP/apoptosis增加有關，通過增加排尿間隔時間和排尿時間導致排尿功能障礙。蘿蔔硫素能顯著活化Nrf2/HO-1軸的表現，減少膀胱活性氧、粒線體Bax轉位、細胞色素C釋放、ATF-6/CHOP和caspase 3/PARP/apoptosis，從而通過縮短排尿間期和排尿時間來改善排尿功能。根據研究結果，我們認為蘿蔔硫素通過激活Nrf2/HO-1信號通路保護了粒線體功能，並抑制糖尿病誘導的ROS、內質網壓力、細胞凋亡和排尿功能障礙。 研究顯示，天然植化素槲皮素與蘿蔔硫素，的確具有保護糖尿病大鼠泌尿系統之效益。Item 一條根萃取物活性成分改善環磷醯胺誘導膀胱功能障礙與病理機制之大鼠模式(2019) 吳宮頡; Wu, Kung-Chieh一條根（I-Tiao-Gung）在金門當地已經普遍被廣泛使用於治療風濕性疾病以及痠痛之傳統中草藥。而金門一條根屬於豆科植物的闊葉大豆（Glycine tomentella Hayata），且豐含天然植物雌激素黃酮類及酚類物質，有研究指出一條根具有抗發炎及抗氧化能力之功效。 膀胱過動症（OAB）是一種很常見且又很容易被忽略的疾病。膀胱過動症的起因是由多重因素所造成的，如尿道出口阻塞、細菌感染及尿路上皮受損等症狀，在病生理學上，當膀胱過動症確診後，會引起尿道損傷及慢性發炎的症狀。環磷醯胺（Cyclophosphamide, CYP）是一種化療藥物，具有高毒活性代謝物，在尿液中對膀胱產生急性或慢性之損傷，包含出血性膀胱炎。我們使用環磷醯胺腹腔注射誘導膀胱過動症的大鼠模式，當膀胱發炎時機械敏感性的傳入神經變得較敏感，將導致膀胱過動（Bladder hyperactivity）。膀胱發炎會引起活性氧（ROS）的產生，而活性氧是氧化壓力形成的原因之一，且其最終可能會導致膀胱功能障礙。 因此，我們探究內服給予中藥一條根萃取物中黃豆戒（Daidzin）活性成分對環磷醯胺誘導膀胱炎、氧化壓力、纖維化和發炎及膀胱過動症之治療潛力。本研究使用Wistar 大鼠，其CYP給予方式為腹腔注射，一條根及黃豆戒為口服管餵方式。我們透過西方墨點法檢測，蕈鹼受體M2和M3和P2X2和P2X3嘌呤能受體以及3-硝基酪氨酸（3-NT）和NADPH氧化酶4（NOX4）的表現，以及動物膀胱內壓與尿道外括約肌電圖相關之檢測。此外，我們透過超靈敏化學發光分析儀，從而確定了膀胱活性氧（ROS）的量，以及透過細胞因子陣列來確認多種細胞因子譜的表現包含在內的MMP-8和TIMP-1。我們結果顯示，一條根萃取中黃豆戒活性成可有效改善環磷醯胺誘導膀胱炎和恢復第二階段的活性作用（EUS-EMG），並抑制P2X2，P2X3，M3受體，3-NT，NOX4的表達。結論，一條根萃取成分和其主要活性成分黃豆戒可降低環磷醯胺誘導氧化壓力且可抑制環磷醯胺造成之MMP-8、TIMP-1、發炎和纖維化。Item 新型AMPK活化劑Nstpbp168對於胰島分泌細胞的保護作用(2013) 邱富嶼; Fu-Yu ChiuNstpbp168是由植物分離出來的純化合物，在我們先前的研究發現它是一種新穎的AMPK活化劑。而本次研究目主要是探討Nstpbp168在氧化壓力及脂質毒性下對胰島素分泌細胞的活存率與活性氧化物產生是否是有正面影響。在氧化壓力的刺激下，胰島素分泌細胞RINm5F曝露於含有40 μM過氧化氫溶液，而後投予100 μM Nstpbp168培養十八小時，計數細胞的存活率與活性氧化物生成量。此外，在脂質毒性刺激方面，則是將RINm5F及肝臟細胞HepG2培養於含有100 μM Nstpbp168 及palmitate/BSA混合物的培養液，進而以MTT檢測其細胞存活率及DCFH-DA染劑觀察細胞內超氧物質含量的螢光圖像。研究的結果顯示，Nstpbp168可以在過氧化氫誘導之氧化壓力下呈現劑量依存的方式防止細胞死亡。此外，在NBT檢測的結果發現細胞經由Nstpbp168處理後能有效抑制過氧化氫所誘導出活性氧化物，並證明Nstpbp168對於AMPK的活化呈現劑量依存的關係。AMPK的拮抗劑Compound C可明顯阻止Nstpbp168的保護作用在過氧化氫對於胰島素分泌細胞產生的傷害。此外，Nstpbp168具有防止palmitae引起之細胞死亡，推論是藉由促進AMPK活化以減少活性氧的產生。綜以上所述，Nstpbp168對於細胞具有保護作用，可有效防止氧化性壓力及脂質累積之毒性所造成的傷害，而這些保護的功能可能均是藉由促進AMPK活化的機制所達成。Item Nrf2與神經退化性疾病：啟動子多型性與 以氧化壓力為目標的治療策略(2012) 巫逸琦; Yi-Ci WuNuclear factor-erythroid 2 (NF-E2)-related factor 2 (Nrf2)是basic leucine zipper (bZIP)的轉錄因子，可調節抗氧化路徑基因的活化，並維持細胞內氧化還原的平衡。氧化壓力的增加與許多神經性退化性疾病有相關性。舉例來說，帕金森氏症(PD)的致病機制就會受到氧化壓力的影響，增強Nrf2的活化會對於神經細胞有保護性的功效。在polyQ不正常擴增的脊髓小腦萎縮症中，擴增的CAG三核苷酸轉譯出的polyQ蛋白，聚集在細胞內增加細胞內的氧化壓力。本論文先以PCR-RFLP技術，對Nrf2基因啟動子-653 A/G、-651 G/A和-617 C/A多型性，進行帕金森氏症患者(n = 480)與年齡、性別配合的正常人(n = 526)的病例-對照組研究。結果多型性基因型、等位基因頻率、單套型等均並未發現相關性。另外，本研究建立誘導式ATXN3/Q14~75的Flp-In SH-SY5Y細胞株，添加retinoic acid誘導分化後，表現具有病理特徵的ATXN3/Q75融合蛋白會形成聚集，並伴隨神經纖維生長減緩。藉高通量影像分析及免疫轉漬分析，此細胞株處理中草藥NH004、NH008、NH021及NH008某組成份衍生物NH008-1可活化Nrf2的表現，並降低ATXN3/Q75融合蛋白的聚集，故可能發展為有潛能的治療策略。Item 以SCA3誘導細胞模式進行潛力新藥之篩選(2011) 陳星蓉; Hsing-Jung Chen小腦脊髓運動失調症第三型(spinocerebellar ataxia type 3; SCA3)，亦稱Machado–Joseph disease (MJD)，為小腦脊髓運動失調症眾多亞型中最常見的一型，屬於晚發性自體顯性遺傳的神經退化性疾病。主要是因為座落於14q24.3-q32的MJD1基因發生CAG三核苷酸過度擴增的現象，這些擴增的CAG序列會轉譯出含多麩醯胺酸(polyglutamine; polyQ)序列的蛋白質產物ataxin3 (AT3)，突變的AT3會在細胞內聚集，透過蛋白質水解機制切割後，在細胞核內形成包含體(nuclear inclusions; NIs)產生細胞毒性使得細胞死亡。目前SCA3實際的致病機轉尚未明瞭，為了解AT3與SCA3病程中的致病機制，我們建立AT3誘導表現的PC12細胞模式。我們發現75Q細胞在氧化壓力以及蛋白質酶抑制劑處理過後會比27Q細胞更容易產生蛋白質聚集在細胞核以及細胞和周圍的現象，對於壓力藥物的耐受性也比27Q細胞要低許多。因此我們藉由建立的SCA3細胞模式做一系列新穎組蛋白去乙醯酶抑制劑(histone deacetylase inhibitors; HDACi)藥物篩選，結果發現某些抑制劑藥物確實能保護SCA3細胞，提升細胞存活率以及神經細胞分支生長，降低氧化壓力以及蛋白質聚集的現象，並增加組蛋白(histone)乙醯化及活化許多具神經保護性的訊息傳遞路徑例如Hsp27、ERK、 MnSOD 和NF-κB等。因此，組蛋白去乙醯酶抑制劑藥物或許可成為治療SCA3的良好候選療法。Item 熱休克蛋白過度表現及氧化壓力對SCA17細胞模式影響之研究(2009) 王品蓉; Pin-Rong Wang脊髓小腦運動失調症(spinocerebellar ataxias，簡稱SCAs)為體染色體顯性遺傳的神經退化性疾病，有超過28種的亞型。其中的遺傳性第十七型脊髓小腦運動失調症(SCA17)與染色體6q27位置TATA binding protein (TBP)基因的CAG三核苷重複擴增相關。突變的TBP蛋白具有延長的聚麩醯胺(polyQ)片段，可能導致蛋白質結構錯誤摺疊及聚集，而polyQ擴增造成的氧化壓力與疾病形成有關。當細胞處於氧化壓力下，會提升熱休克蛋白的表現，如HSPA5、HSPA8和HSPB1等監護蛋白(chaperones)，以便抵抗氧化壓力所造成的傷害。監護蛋白可經由穩定錯誤摺疊蛋白的結構，降低聚集的生成，來緩和polyQ突變蛋白的毒性。藉由熱休克蛋白和氧化壓力與SCA17的關連性做探討，我們可以更瞭解SCA17的致病機轉，有助於疾病的改善或治療策略的發展。藉誘導式細胞模式的建立，本篇研究結果顯示擴增polyQ的TBP蛋白聚集在細胞核中，且細胞週期呈現較高的sub G1%。表現擴增polyQ的TBP使細胞活性氧分子產量增加，且對staurosporine處理的敏感度提升及缺血清的耐受度下降。短暫表現TBP的細胞模式顯示，HSPA5、HSPA8和HSPB1的過度表現可以降低聚集的生成。Item 第十七型脊髓小腦運動失調症：遺傳檢測暨細胞模式之氧化壓力與細胞毒性研究(2008) 林佩瑛; Pei-Ying Lin第十七型脊髓小腦運動失調症（SCA17）為體染色體顯性遺傳的神經退化性疾病，起因於位在染色體 6q27 位置上的 TATA-binding protein（TBP）基因之 CAG/CAA 三核苷酸重複擴增，轉譯出帶有不正常的聚麩醯胺鏈（polyQ tract）的蛋白質產物，造成蛋白質構形改變而產生錯誤摺疊與聚集，導致疾病。目前SCA17致病機轉尚未完全瞭解，且尚無有效治療方法，加上疾病進程發展及變異極大，因此瞭解 TBP 基因 CAG 三核苷酸重複在族群中的分佈情形及探討可能致病機轉，將對發展疾病治療策略有所助益。本論文即以 SCA17 為主題，首先進行臺灣地區正常人族群、帕金森氏症患者族群、原發性顫抖症患者族群與其它神經退化性疾病患者族群的 TBP 基因CAG 三核苷酸重複遺傳分析，發現 CAG/CAA 重複次數的頻率主要集中在 36 個重複序列，並於 OPMD 及 TICS 疾病中發現有兩名不正常擴增的例子（44 and 45 repeats），顯示 TBP 基因重複擴增序列可能與其它神經疾病相關。另一部分利用年齡與性別配對的 SCA17 淋巴細胞株及建立誘導式 SCA17 細胞模式，檢視氧化壓力與熱休克蛋白在 SCA17 上扮演的角色。氧化劑 TBH 處理後兩種細胞模式皆顯示帶有 polyQ 擴增的細胞對氧化壓力的耐受性顯著差於帶有正常 TBP 的細胞，推論氧化壓力可能參與 SCA17 致病機轉。此外，在 SCA17 淋巴細胞株或誘導式 SCA17 細胞模式觀察到 HSPA8 與 HSPB1 表現量的改變，暗示此兩種熱休克蛋白亦可能參與 SCA17 致病機轉。最後，組蛋白去乙醯酶抑制劑 valproate 可增加帶有 polyQ 擴增細胞的存活率的發現，將有利於找出 SCA17 治療策略的目標。Item 果蠅的TBP功能缺失所導致的細胞凋亡是透過氧化壓力及p53的活化(2013) 楊進勝; Chin-Sern Yong先前研究發現TATA box binding protein gene (TBP) 失去功能，會導致老鼠和斑馬魚早期發育停止及細胞凋亡。TBP如何調控動物發育及細胞凋亡的機制目前並不很清楚的，本論文的主要目的在於研究TBP導致細胞凋亡的性狀在果蠅是否保守，並了解其調控機制，我們發現TBP突變果蠅僅發育至胚胎晚期，且細胞死亡數大量增加。進一步分析TBP缺失細胞即為死亡細胞，顯見TBP對細胞凋亡的調控為自發性的，遺傳分析結果顯示，表現負顯性P53或DIAP1可抑制TBP缺失引起的細胞凋亡，反之大量表視TBP則可抑制P53引起之細胞死亡，顯示TBP為P53引發細胞凋亡作用路徑的成員；此外相較野生型，TBP突變果蠅的總蛋白質量和總核酸量並沒有顯著的減少，顯示TBP可能僅介由影響少數特定基因的表現造成細胞死亡，利用基因微陣列分析，TBP突變果蠅其Prx2540-2基因表現大量降低，Prx蛋白具水解過氧化氫(H2O2)活性，為細胞抵抗氧化壓力之重要成員。實驗發現TBP突變果蠅其過氧化氫濃度相較野生型果蠅為高，且餵食抗氧化劑可有效增長TBP突變株果蠅的生存壽命。綜言之，我們証實TBP功能缺失可籍由活化P53及氧化壓力造成細胞死亡。Item 手術條件下的靜脈輸液治療: 從基礎醫學研究到臨床醫學應用(2016) 吳峻宇; Wu, Chun-Yu靜脈輸液可視為一種藥物治療，為改善低血容狀態下身體循環的第一線治療方式，因此可算是所有外科病人最常接受到的治療項目。適當的靜脈輸液應包含三個層面：正確的輸液種類、正確的輸液時機以及正確的輸液總量，這三個層面只要有其中一項沒有達到，靜脈輸液便可能無法發揮療效，甚至導致傷害。 靜脈輸液治療的目的，在於改善低血容狀態(例如:出血性休克)下的循環狀態。目前文獻已經證明，微循環(小於100微米小血管)的改善，比傳統大循環系統指標(如:平均動脈壓、心跳數)，與預後有更高的關聯性。不同腹部臟器微循環，例如:肝、腎、腸組織，不但對低血容有不同的耐受度，也是病變發展成多器官衰竭的關鍵因子。治療低血溶狀態時，唯有改善腹部臟器微循環才可真正預防不可逆的器官傷害。因此本論文的第一部分前半段，乃是利用雷射斑駁影像技術，發展出可即時同步觀察在出血性休克時，腹部臟器微循環變化的大鼠模型。我們發現雖然微循環血氧濃度在各腹部臟器中，有等量下降的狀態，但以腸黏膜微循環血流量對於出血性休克有最差的耐受性，相對之下，肝腎與周邊肌肉組織的微循環血流量則有較佳的耐受性。 而本論文的第一部分後半段，則希望進一步探討臨床上常使用的靜脈液體製品包含晶體溶液(如:0.9%食鹽水)、膠體溶液(如:澱粉製品與明膠製品)以及高張溶液(如:3%食鹽水)，在出血性休克狀態下，對腹部臟器微循環的療效差異。以不同種類靜脈輸液治療，不僅可能會造成不同程度的循環改善，也可能伴隨不同程度的缺血再灌流症狀而造成不等量的氧化壓力。在腹部臟器中，以腎臟有最明顯的缺血再灌流效應。臨床上，以治療膠體溶液治療重症病人的低血溶狀態，被發現有較高機率在治療後發生急性腎損傷，這個現象可能與缺血再灌流與氧化壓力有關。因為氧化壓力產物有極短的半衰期，因此我們利用活體自由基偵測技術，精確定量大鼠在出血性休克下與靜脈輸液治療後，腎組織活體自由基產生的變化。我們發現，以靜脈輸液治療出血性休克，晶體溶液無法改善腸黏膜微循環血流量，只有膠體溶液與高張溶液可有效改善腸黏膜微循環血流量。但是膠體溶液，包含澱粉製品以及明膠製品，相較於晶體溶液與高張溶液，會產生極大量的腎臟自由基，此現象極有可能與臨床文獻觀察到膠體溶液造成的急性腎損傷相關。總結本論文第一部分的前半與後半段，我們發現到腸黏膜微循環血流量對於出血性休克狀態下有最明顯的損傷，臨床的靜脈輸液治療僅有膠體溶液與高張溶液可以有效改善腸黏膜微循環血流量。但是使用膠體溶液治療時，有可能造成缺血性再灌流症狀而產生大量腎臟氧化壓力而導致急性腎損傷。 臨床上，如何精確判斷適當的靜脈輸液量時機。目前臨床上最適合的輸液指標，當屬動態輸液反應性指標。這類指標可反映出在正壓呼吸下，心臟與肺部間相互影響下的變異率。體容越低的狀態下，心臟受到呼吸的吸氣期與吐氣期的擠壓影響變越大，反映在同一個呼吸週期下的脈搏壓、心輸出量的變異率變越大。因此當動態輸液反應性指標反映出變異率高過閾值時，給予靜脈輸液便有極高機率可提升心輸出量(此現象稱之為「輸液反應性」)，進而改善循環。但這類指標過去多半是在血管張力正常的病人中被應用，而臨床上有某一些特殊病理狀態會造成血管張力的異常，例如:肝硬化的患者，因為體內血管擴張物質無法被正常代謝，而有周邊血管阻力大幅下降的特徵。但是動態輸液反應性指標，卻從未在肝硬化病人身上證實有效。本論文的第二部分，探討我們在肝硬化病人，驗證目前臨床上最常見的三種動態輸液反應性指標，包括:脈搏壓變異率、心搏量變異率以及指端血容積變異率，是否在肝硬化病人也適用。結果我們發現，這三個指標在肝硬化病人身上，雖然較其他外科病人有較為下降的準確度，仍保有臨床實用的偵測度，足以幫助臨床醫師，判斷肝硬化病人是否可藉由靜脈輸液而改善心輸出量與循環。 本論文的第三部分，希望探討如何判斷正確的靜脈輸液總量，而此議題針對不同的手術器官，可能存在不同的標準。因為若器官沒有缺血風險存在，則即使在靜脈輸液可提升心輸出量而改善循環的時機下，過量的輸液仍可能導致組織水腫而造成傷害。以腦部手術而言，此類的臨床判斷充滿挑戰性。因為腦部組織佔總體心輸出量的比例極高，尤其在手術過程中可能有更高的血流量需求，但同時過多的輸液也可能因腦組織水腫而造成傷害。前述之動態輸液反應性指標，研究證實存在著一個「灰色地帶」，在此區間的下界限值與上界限值，分別代表了對輸液反應性高特異度與高敏感度的狀態，亦即手術中輸液若以下界限值與上界限值為目標，分別代表著儘量輸液增加心輸出量與謹慎(限制性)輸液以避免過多體液的輸液策略。依此特性，我們在腦部切除手術患者，驗證究竟腦部手術的靜脈輸液量較適合在動態輸液反應性指標灰色地帶的上界或下界。研究結果發現，靜脈輸液控制在下界的患者，有較短的加護病房停留時間、較少的術後神經學症狀、較佳的出院日常生活功能性評分、較少的術中乳酸堆積，以及較少的術後血清神經專一性蛋白表現。證實接受腦部手術患者 ，術中輸液量應以儘量增加心輸出量為目標，才是較佳的輸液策略。 靜脈輸液治療在手術狀態下的重要性，在現代醫學的進步下，不但沒有減少，反而更加重要。總結本論文的發現，我們從基礎醫學的動物模型探討腹部臟器微循環在低血容下的病理變化，進一步證實高張溶液與膠體溶液對腸黏膜微循環的效果，並且發現膠體溶液對於腎臟缺血再灌流的現象可能與急性腎損傷相關。進一步到臨床應用上，證實動態輸液反應性指標此類參數，在肝硬化此類血管張力特殊變化的病人，仍然足夠精確幫助臨床醫師判斷靜脈輸液的時機點。最後，在腦部手術中，證實靜脈輸液量已儘量增加心輸出量的目標的策略，對於預後有較佳的效果。對於靜脈輸液治療中，「正確的輸液種類、正確的輸液時機以及正確的輸液總量」這三個層面，未來有更進一步機制的探討，將有機會更加增進手術患者的臨床照護。我們的研究從此觀點出發，未來，也將在此層面做出更深入的探討。