學位論文
Permanent URI for this collectionhttp://rportal.lib.ntnu.edu.tw/handle/20.500.12235/73908
Browse
281 results
Search Results
Item 中藥配方顆粒劑B307對運動與代謝的影響(2021) 莊泰源; Chuang, Tai Yuan人類使用草藥已有數千年的歷史，長期以來亞洲人也經常使用中草藥來治療各種疾病。在臺灣，近年來也開始用現代科學的角度研究中草藥對身體功能的影響。目前已有許多研究結果顯示：中草藥能夠增促進改善運動期間代謝功能的調節以及增進運動的表現。因此，中草藥的應用也漸漸受到運動科學領域的重視。本論文以人參、丹參、五味子、麥門冬等四種中草藥組成的中藥配方顆粒劑B307作為增補劑，利用細胞與動物模式，探討中藥B307對運動表現與代謝功能調節的影響。論文第一部分實驗首先利用SH-SY5Y人類神經瘤母細胞與H9c2大鼠心肌细胞模式，檢視B307對神經與心肌細胞放電表現與細胞內鈣離子流的影響，實驗結果發現B307處理會顯著增加SH-SY5Y神經細胞放電表現與H9c2心肌細胞的鈣離子內流強度。論文第二部分實驗使用鴿子離體胸大肌模式，檢視B307對鴿子離體胸大肌的收縮力量與疲勞曲線的影響，實驗結果發現鴿子餵食中藥B307二週後，離體胸大肌的收縮力量與疲勞曲線明顯大於空白處理的鴿子胸大肌，而且較不容易產生疲勞。綜合實驗第一、二部份結果，說明B307可以透過增加神經細胞放電表現與心肌細胞鈣離子內流來增強鴿子胸大肌的運動表現。論文第三部分實驗使用去甲狀腺大鼠作為實驗動物，檢視餵食B307後，是否可以明顯改善代謝功能低下的症狀？實驗結果發現甲狀腺大鼠餵食中藥B307二週後，可以有效緩解大鼠甲狀腺切除引起的心肺運動功能障礙，實驗第三部份結果說明B307可以作為緩解甲狀腺切除引起的心肺運動功能障礙的替代醫療。綜合上述結果，我們認為以人參、丹參、五味子、麥門冬等四種中草藥組成的中藥配方顆粒劑B307，應該可以作為增強運動與代謝生理功能的增補劑。Item Item Item 干擾素誘導四肽重複蛋白5 (IFIT5) 在神經膠質母細胞瘤的細胞增殖與移動所扮演的角色(2021) 陳亭均; Chen, Ting-Chun多型性神經膠質母細胞瘤 (Glioblastoma multiforme，GBM) 是成人最常見且最為惡性的原發性腦癌，以高復發率和低5年生存率著稱，目前還沒有發現有效的治療方法。現在主要的治療方式是以手術切除合併化療和放射治療。之前研究表明，神經膠質母細胞瘤之癌幹細胞 (Glioblastoma stem cells, GSCs) ，與腫瘤之增生、轉移、抗藥性及預後復發有關。若能針對調控神經膠質母細胞瘤之癌幹細胞(GSCs)的生長維持機制，找出抑制腫瘤生長的方法，將會是治療多型性神經膠質母細胞瘤(GBM)的新方法。IFIT5 (Interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 5)是IFIT protein家族的一員，為細胞在病毒防禦上的重要蛋白質。IFIT5在細胞表面肌動蛋白絲(actin)豐富處表現。實驗室之前的研究使用OncoLnc分析TCGA資料庫發現不論在神經膠質母細胞瘤或其他低程度神經膠質瘤中，高表現IFIT5的患者有較低的整體存活率。為研究IFIT5在神經膠質母細胞瘤的功能，本實驗利用U87-MG此種多型性神經膠質母細胞瘤及其過度表現IFIT5的細胞株發現，過度表現IFIT5會抑制多型性神經膠質母細胞瘤及其癌幹細胞的增殖和移動能力。Item 入侵與原生淡水龜的數感認知比較(2021) 林鳳君; Lin, Feng-Chun烏龜能辨別數量嗎？這個問題不只是認知心理學的範疇，更與行為生態息息相關。例如雄性會選擇加入雌性個體比較多的群體；領域的佔有者也會依據入侵者的數量決定要逃跑還是奮力一搏，這些行為的決策都奠基於動物具有數量感知能力。在魚類、鳥類和哺乳類上都已有大量研究投入，唯獨爬行動物是否能辨別數量，研究仍非常罕見。在第一章我以臺灣原生淡水龜種斑龜為研究對象，共分為兩個實驗：實驗一為一系列比率由低到高的順序進行的五組測驗；實驗二則是包含共三十二種數量組合的混合測驗。訓練斑龜基於「大於」的抽象規則來辨別數量，而非認特定數量或圖形。研究結果顯示，斑龜能夠成功辨別本研究最難的數字組合：九比十，也發現其數感認知表現符合韋伯率，即兩數量間的比率越高則代表辨別難度越難因此表現變差。另外其表現隨著天數而顯著提升，顯示斑龜具有學習能力。第二章我用全球百大入侵種之一的紅耳龜進行與第一章一樣的實驗，發現當面對必須靈活運用抽象概念的測試時，入侵種的數感表現優於原生龜，顯示紅耳龜可能有較佳的行為彈性。本研究中烏龜所展現的優異數感能力接露爬行動物的認知能力很可能是被嚴重低估的，也暗示其生態行為決策機制可能並不簡單，本論文也是首度試圖透過數感能力連結認知能力與入侵生物學的研究。Item Ngal蛋白對自體顯性遺傳多囊腎疾病細胞模式之治療影響與機制(2021) 莊欣穎; Chuang, Hsin-Yin多囊腎疾病(Polycystic kidney disease, PKD)為最常見的遺傳疾病之一，盛行率高達1:400~1:1000，患者主要病徵為其腎元中各個部位發展出許多充滿液體的囊泡(cysts)構造。自體顯性多囊腎疾病(Autosomal dominant polycystic kidney disease; 簡稱ADPKD)為多囊腎疾病中最常見的類型，由PKD1 (佔其中85%)或PKD2 (佔其中15%)基因發生突變所導致。PKD1與PKD2分別表現polycystin-1 (PC1)與 polycystin-2 (PC2)蛋白，而PC1或PC2的功能缺損造成腎臟上皮細胞之不正常增殖，並進而導致囊泡形成。隨著ADPKD的進程，囊泡體積增加並破壞正常腎臟組織的結構，進而造成腎功能損傷，最終導致患者之腎臟衰竭。我們先前的研究建立了ADPKD之疾病模式鼠(Pkd1L3/L3小鼠)，並利用基因轉殖技術使病鼠在腎臟中大量表現外源性neutrophil nelatinase-associated lipocalin (Ngal)，結果顯示能夠減緩囊泡的進程並延長病鼠的壽命。Ngal是一22-kD之分泌性蛋白，尿液中之Ngal含量常用作檢測患者是否具有腎臟疾病的指標，而文獻中指出Ngal與其受器Ngal receptor (Ngal-R)之交互作用與細胞內鐵離子運輸有關，並能進一步誘導細胞凋亡(apoptosis)。然而，Ngal在ADPKD中之作用機制仍未知，如用動物模式(in vivo)進行研究有許多困難，如細胞間複雜之交互作用以及研究費時等，因此在本研究中建立3D細胞平台，並直接利用ADPKD疾病細胞模式(Pkd1L3/L3)進行Ngal蛋白之作用機制研究。細胞存活實驗(MTT)與細胞增殖實驗(BrdU incorporation)之結果顯示小鼠Ngal重組蛋白(mNgal)顯著降低ADPKD細胞模式之細胞活性與增殖，並顯著地抑制囊泡生長。根據流式細胞儀分析(flow cytometry)與西方墨點法(western blot)結果顯示，小鼠Ngal重組蛋白顯著抑制ADPKD細胞中ERK與AKT訊息傳遞路徑並誘導細胞凋亡與細胞自噬(autophagy)。再者，於ADPKD細胞中大量表現分泌性小鼠Ngal蛋白顯著抑制細胞增殖與囊泡生長，但大量表現非分泌性小鼠Ngal蛋白則不具有相同之抑制效果；這些結果表示Ngal需要從ADPKD細胞中被分泌出，才能抑制細胞增殖。未來我們將利用CRISPR技術將疾病細胞之Ngal-R基因剃除，進一步探討Ngal與Ngal-R在ADPKD中之作用機制。希望有助於了解Ngal在ADPKD細胞中之治療效果與機制。Item 利用海洋深層水預處理幹細胞可透過SIRT1抗氧化路徑修復由D-galactose所誘導老化大鼠的心臟功能(2021) 張嘉鴻; Cheang, Ka-Hung心臟衰老是導致心血管疾病的關鍵因素之一，例如心功能下降和心肌梗塞。先前的研究證實，幹細胞具有自我更新和分化的能力，因此幹細胞在修復受損組織中起著重要的作用。幹細胞可以遷移到心臟，並通過周圍的微環境分化為新的心肌細胞，從而使衰老的心臟再生。實驗結果表明，海洋深層水（DSW）富含礦物質和有機營養素，並具有抗氧化和抗炎特性。目的： 本研究探討DSW的預處理是否可以增強幹細胞功能。如果可以的話，DSW預處理幹細胞對老化心臟再生的治療效果要比一般幹細胞治療的更有效。方法：間質幹細胞（MSCs）和DSW將用於研究DSW對幹細胞能力的增強作用。然後將進行衰老的動物模型以進一步闡明對DSW預處理的幹細胞的治療效果。結果： 細胞實驗證實DSW可通過激活IGF1R增強幹細胞功能。將8週齡的Wistar雄性大鼠用於老化動物模型，並將老鼠分為四組，包括Sham（6個月大的大鼠），Aging（以D-galactose誘導2個月 ），aging + Stem cell（以一般幹細胞治療）和aging + DSW-Stem cell（以DSW預處理後的幹細胞治療組）。先前的實驗結果表明，在老化組的心臟組織中可以觀察到cytochrome C, caspase 3等細胞凋亡蛋白的表現量有所上升；在本研究結果表明，在老化組p53老化蛋白質表現量上升； Sirt1，SOD等抗氧化蛋白表現量下調。相比之下，與Aging + Stem cell組（以一般幹細胞治療），Aging + DSW-Stem cell組（以DSW預處理後的幹細胞治療組）相比，心臟組織中的上述所有蛋白質表現均得到顯著改善。結論： 與普通幹細胞相比，DSW能夠增強幹細胞幹性，而DSW預處理的幹細胞在治療衰老引起的心力衰竭方面顯示出潛力。Item 以阿茲海默氏症小鼠初級細胞培養和動物模式評估具TrkB促效劑潛力化合物之治療效果(2021) 李佳瑜; Li, Chia-Yu阿茲海默氏症(Alzheimer' s disease, AD)是目前最常見的神經退化性疾病之一，至今尚無顯著有效的治療方法，該疾病會導致認知和行為問題，不論是對於個人或社會都造成極大的負擔。AD在病理學上主要有兩個病徵：類澱粉蛋白(β-amyloid peptides , Aβ)堆積成的斑塊(plaques)及Tau蛋白的過度磷酸化所導致的神經纖維糾結(neurofibrillary tingles, NFTs)。許多研究顯示AD病患腦中之腦源性神經滋養因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)濃度較正常人低，且此現象可讓更多的Aβ生成。BDNF結合其受體原肌球蛋白相關激酶B(tropomyosin-related kinase B, TrkB)可調節長期增益效應(long-term potentiation, LTP)、突觸可塑性和神經元分化等，因此增強BDNF/TrkB訊號傳遞成為AD治療之潛力策略。7,8-二羥基黄酮(7,8-dihydroxyflavon, 7,8-DHF)是目前已知的最佳TrkB促效劑，可與細胞膜上的TrkB受體結合並引發受體之同源二聚化而啟動下游之訊息傳導。本研究使用7種與7,8-DHF結構類似，以及8種與Coumarin結構相似之化合物，篩選出具潛力之TrkB促效劑。首先確定Aβ25-35對小鼠海馬迴初級細胞培養的有效傷害濃度為5 µM，以建立AD體外模式篩選平台；我們以此平台篩選出最具神經保護之化合物ZN014進入動物實驗。我們以透過立體定位注射Aβ25-35到小鼠海馬迴CA1區建立AD小鼠模型，再評估7,8-DHF與ZN014對AD動物模式之效用，用藥期間進行一系列行為實驗，結果顯示ZN014可有效改善Aβ25-35所導致的短期記憶受損。在病理與分子機制分析上，我們利用免疫組織化學染色和西方墨點法分析小鼠海馬迴組織，結果表示ZN014可改善Aβ25-35所導致的神經細胞缺失，也可以緩解小鼠海馬迴的神經發炎。ZN014可能是藉由降低神經發炎以保護神經，進而改善因Aβ25-35所導致的記憶受損。綜合上述結果ZN014也許可以開發成具有AD治療潛力的藥物。Item 利用Aβ折疊報導細胞篩選黃酮及香豆素衍生物作為促效劑標的BDNF受體TRKB的阿茲海默症治療策略(2021) 黃鏡嘉; Huang, Ching-Chia阿茲海默症(AD)是與記憶缺陷和認知功能下降相關的進行性神經退行性疾病。病理學上AD的特徵是大腦中存在澱粉樣蛋白β (Aβ)聚集體(澱粉樣斑塊)和由高磷酸化的Tau蛋白形成的神經原纖維纏結(NFT)。腦源性神經營養因子(BDNF)是神經營養蛋白家族的成員，以高親和力與原肌球蛋白相關的受體激酶B (TRKB)結合，活化下游信號傳導，來促進神經元的存活、分化和神經可塑性。已經發現AD患者的腦中BDNF和TRKB表達水平降低，並且BDNF降低和TRKB受損導致AD中的神經變性。AD小鼠模型的海馬迴中施用TRKB特異性促效劑7,8-二羥基黃酮(7,8-DHF)，可改善了空間記憶並降低樹突損傷，表明TRKB信號傳導增強，為有希望的AD治療策略。本研究使用表達Aβ-GFP的人類神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞，對15種黃酮和香豆素衍生物，進行Aβ聚集抑制性及神經保護性的評估。在測試的化合物中，ZN006、ZN013、ZN014、ZN015可抑制Aβ蛋白聚集、降低活性氧化物(ROS)、及抑制乙醯膽鹼脂酶(Acetylcholinesterase)活性，其中ZN014、ZN015並能抑制凋亡蛋白酶-1 (Caspase-1)活性及促進神經突生長(Neurite outgrowth)。在TRKB訊息傳遞路徑上，ZN014、ZN015可透過TRKB受體的Y516、Y817磷酸化，及下游ERK激酶T202/Y204磷酸化、AKT激酶S473磷酸化的活化，進一步促進轉錄因子CREB的S133磷酸化，來增強神經營養因子BDNF及抗凋亡蛋白BCL2的表現。RNA干擾(RNAi)靜默TRKB基因表現的實驗，驗證了這兩種化合物經由TRKB訊息傳遞的神經保護性。總言之，研究結果顯示ZN014和ZN015可抑制氧化壓力及乙醯膽鹼脂酶活性，並增強BDNF-TRKB訊息，來降低Aβ毒性，有潛能應用在AD的治療上。Item 深層海水對急性腸胃炎的預防及治療功效之探討(2021) 李冠葦; Li, Guan-Wei腸胃道是人體進行食物消化與養分吸收最主要的位置，在維持身體正常運作中扮演重要角色。除幽門螺旋桿菌感染外，不良生活習慣、不當用藥、壓力累積等導致胃潰瘍產生，反覆患病且未改善，則易導致胃出血、胃穿孔，甚至罹患胃癌。另一方面，潰瘍性結腸炎是一種自發性結腸黏膜慢性炎症，當前療法不易根治且易復發，近年亞洲各國患病率逐年增加，長期患潰瘍性結腸炎容易讓腸黏膜發育不全，也會使罹癌風險增加。對生活步調緊湊的社會而言，如何有效緩解、控制胃潰瘍及潰瘍性結腸炎症狀、降低發病率並有效治療是重要的研究議題。深層海水得自海平面200公尺以下富含各種離子與高生物活性的有機成分之低溫、乾淨穩定的無污染水。先前研究顯示，深層海水中的部分物質具有清除活性氧物質之功效且能抑制十二指腸潰瘍與細胞凋亡，本研究欲探討飲用深層海水的保護特性，降低胃潰瘍與結腸發炎反應，緩和急性胃腸發炎病狀。實驗結果顯示，深層海水能減少因潰瘍產生的自由基、透過抑制p38與NF-κB活化降低發炎反應、調節P2X7相關路徑減緩細胞凋亡，具抗氧化、抗炎、抗凋亡之功效。