學位論文
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Item 利用斑馬魚胚胎模式研究烯酸酯類殺菌劑pyraclostrobin 之毒性(2023) 葉凡瑄; Yeh, Fan-Hsuan百克敏(pyraclostrobin)是一種被大量使用的農業除真菌劑,透過地表徑流等途徑汙染環境,在世界各地的水域已被檢出。其對於水生生物包括魚類以及兩棲類,具有極高的非專一毒性。先前研究證實百克敏對於斑馬魚具有粒線體毒性、心毒性並造成發育延遲、增加氧化壓力、降低活動力。但對魚類其他生理功能的影響仍不清楚。本研究利用斑馬魚胚胎作爲毒理模式,將其曝露於100-1000 ppb的百克敏96小時後,觀察其對於基因表現、離子調節、側線感覺功能的變化;曝露百克敏120小時後,觀察聽覺與視覺行爲的改變。並利用轉基因螢光魚觀察中樞神經系統的影響。結果顯示百克敏96小時半致死濃度為204.6 ppb。濃度≥100 ppb 造成心率下降、側線毛細胞損傷、觸碰逃跑速度下降;濃度≥150 ppb造成體長降低,眼睛、耳石囊、耳石面積變小,卵黃消耗減少,體内Ca2+、K+離子含量下降,離子細胞數目減少;濃度200 ppb造成圍心腔水腫、皮膚幹細胞減少以及側線毛細胞減少。利用RNA定序分析基因表現發現許多異常包括:離子調節(atp1a1a, atp2b,atp6v, kcnj1a, rhcg)、側線感覺(cib2, myo6b, s100)、粒線體電子傳遞鏈(cytb, cox3、cox19)、內耳感覺(otomp, cep290, oc90)、視覺(cabp5a, clcc1)、細胞凋亡(casp3, casp8, casp17)等相關基因。在行為實驗發現,百克敏會降低聲音驚嚇反應之敏感度,並延長視覺運動反應時間。螢光魚的結果顯示,百克敏會造成脊髓運動神經元減少。綜上所述,本研究提出百克敏可能會造成魚類離子調節、周邊感覺(側線、視覺、聽覺)以及中樞神經異常,對魚類生存造成威脅,需更審慎評估百克敏的使用。