學位論文

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    海洋深層水通過IGF1R的表現強化間葉幹細胞的能力以調節microRNA-880-3p治療老化所造成的心臟疾病
    (2021) 武柏寬; Wu, Po-Kuan
    衰老是降低心臟功能的原因之一，幹細胞療法可能為治療由衰老引起的心臟功能障礙提供更光明的未來。海洋深層水（DSW）顯示出對細胞保護的有益作用，但細胞機制仍不清楚。這項研究旨在研究用海洋深層水（DSW）預處理的間葉幹細胞是否比未經海洋深層水（DSW）預處理的間葉幹細胞具有更好的心臟保護作用。在細胞研究中，我們發現深海水通過膜蛋白胰島素樣生長因子1受體（IGF1R）的表達提高幹細胞活力。此外，我們證實miR-880-3p在老年心肌細胞中表現量增加。在與幹細胞共培養的老年心肌細胞中，我們發現海洋深層水（DSW）預處理的幹細胞顯著降低了老年心肌細胞中衰老的miR-880-3p的表現，從而導致了心肌細胞功能的恢復。在動物研究中，在治療老年的大鼠心臟中，我們發現海洋深層水（DSW）預處理的幹細胞顯著降低了老年心臟中老化的蛋白表現與纖維化表現，從而導致了心臟功能的恢復。此外，我們也證實海洋深層水（DSW）預處理的幹細胞能夠修復心臟中細胞雜亂的排列與細胞數量。
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    利用幹細胞分泌體調節粒線體動態失衡所造成的巨噬細胞極化藉以改善痛風
    (2021) 郭承樺; Kuo, Cheng-Hua
    痛風性關節炎是由單鈉尿酸鹽結晶(monosodium urate crystals, MSU)的堆積所造成的，而巨噬細胞在急性痛風性關節炎中扮演很重要的角色。活化的巨噬細胞通常被分成兩大類：典型活化巨噬細胞(classically activated macrophages, M1)與另類活化巨噬細胞(alternatively activated macrophages, M2)，而他們分別具有促發炎與抗發炎的功效。粒線體動態被視為維持正常細胞功能的一個機制，在先前的研究中，幹細胞能旁分泌(paracrine)出生長因子等進而影響周圍的細胞。將這些幹細胞旁分泌出來的分泌體(secretome)收集成條件培養基(conditioned medium)做後續實驗，而為了能使幹細胞條件培養基(stem cell conditioned medium, SCM)能更加有效，會將幹細胞預先培養在含有發炎因子的環境中數小時，使其提早適應病理環境藉以強化他，並收集強化幹細胞條件培養基(strengthened stem cell conditioned medium, SSCM)。高尿酸血症所引起的痛風性關節炎由於發作時只能利用一些化學藥物來消炎止痛，而且這些藥物會導致胃腸道與腎臟的毒性，所以本研究想利用幹細胞的分泌體來進行治療。在細胞實驗中，我們利用不同濃度的MSU結晶刺激巨噬細胞，結果顯示巨噬細胞的ROS含量、發炎現象隨著結晶濃度的增加而隨之增加，粒線體動態則是隨著結晶濃度的增加而愈趨向融合(fusion)。在經過發炎環境的預處理後，幹細胞CXCR4的蛋白質表現量上升，證實能透過這條路徑強化幹細胞，且強化幹細胞conditioned medium能使發炎現象下降並改善粒線體動態的不平衡，也能夠使M1巨噬細胞的數量下降。在動物實驗中，強化幹細胞conditioned medium能夠使關節中細胞浸潤的現象降低，並能夠使軟骨組織的排列較為緊密且量多，而粒線體動態也有改善的現象。因此強化幹細胞conditioned medium對於痛風有改善的潛力。
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    短期高糖合併發炎微環境前處理促使間葉幹細胞活化並強化糖尿病性肝損傷的治療
    (2020) 凌銘暘; Ling, Ming-Yang
    ['研究背景：\n肝功能障礙是糖尿病相關的併發症之一。除了針對糖尿病進行藥物治療，幹細胞移植在治療糖尿病性肝病方面顯示出潛力，這是因為幹細胞具有組織再生的特點。儘管幹細胞有能力恢復肝功能在糖尿病、高葡萄糖環境引發的糖尿病減少幹細胞功能在幹細胞移植到糖尿病患者因為高葡萄糖環境引起的氧化壓力在幹細胞啟動凋亡信號，導致減少細胞生存能力和減少組織再生幹細胞的特徵。\n\n研究目的：\n本研究推測，幹細胞經短期高血糖合併發炎微環境前處理後，再移植到糖尿病環境中可提高幹細胞的特性和細胞存活率，並強化對糖尿病性肝損傷的治療。\n\n研究結果\n體外研究結果表明，短期(3小時)將間葉幹細胞暴露於高血糖結合炎症微環境(稱為高血糖前處理幹細胞)可通過表達受體酪氨酸激酶Receptor tyrosine kinase (c-Kit)提高幹細胞的生存能力和幹細胞特性。另外，高血糖前處理的幹細胞能抑制糖尿病肝臟活性氧物質和發炎因子的產生，對糖尿病肝的再生效果優於未經高血糖預處理的幹細胞，提示高血糖幹細胞與炎症微環境的結合啟動了幹細胞在治療糖尿病性肝病中的功能。\n']
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    杜鵑花酸提升間葉幹細胞旁分泌效應調節抗老化因子miRNA-7850-5p 延緩皮膚衰老
    (2020) 林冠宇; Lin, Kuan-Yu
    ['紫外燈（UV）可以誘導皮膚組織的光老化，但從幹細胞釋放的生長因子顯示出，對紫外燈誘導的皮膚老化具有抗老化作用。杜鵑花酸對細胞有保護的作用，但作用機制仍然不清楚。這項研究調查了用杜鵑花酸處理前後的間葉幹細胞，對於治療紫外燈誘導的皮膚老化，是否能表現出不一樣的抗老化作用。體外研究證實，杜鵑花酸可透過增加幹細胞膜蛋白CXCR4的表現來促進旁分泌。另外本研究發現老化標記miRNA-7850-5p在老化的皮膚細胞中其表現量被往下調降。接下來，將UV誘導老化的皮膚細胞放入幹細胞條件培養基中，研究發現，與一般幹細胞相比，經杜鵑花酸處理強化過的幹細胞條件培養基對miRNA-7850-5p有更好的提升作用。這表示用杜鵑花酸預處理的幹細胞條件培養基可通過調節衰老標記miRNA-7850-5p來抑制UV誘導皮膚細胞中的老化信號。動物研究證實，在紫外燈加幹細胞條件培養基治療組和紫外燈加杜鵑花酸強化幹細胞條件培養基治療組，其表皮和膠原蛋白的厚度均有改善的效果，而且皮下毛囊的數目均有增加的趨勢。另外在老化的標記蛋白p53和p21的表現量均有下降的趨勢，而膠原蛋白的標記蛋白Collagen 1 A1的表現量均有上升的趨勢。但在經過觀察後，紫外燈加杜鵑花酸強化幹細胞條件培養基治療組中的表皮、膠原蛋白、皮下毛囊、老化的標記蛋白p53和p21、膠原蛋白的標記蛋白Collagen 1 A1相較於紫外燈加幹細胞條件培養基治療組有更好的改善效果。結論，幹細胞條件培養基在改善皮膚老化有明顯的治療潛力，而在使用杜鵑花酸強化幹細胞條件培養基有更明顯的治療效果。']
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    牛樟芝子實體對四氯化碳誘導慢性肝損傷之功效
    (2021) 陳麗雯; Chen, Li-Wen
    肝臟是人體最重要的代謝器官，其功能主要包含代謝宿主及外來分子等。由氧化壓力所引起之肝損傷是造成不同肝臟疾病最主要原因之一。四氯化碳(CCl4)是一種肝毒性化合物，常被使用於建立肝損傷之動物模型。牛樟芝(Antrodia cinnamomea, AC)為一種生長於台灣山區之特有種，先前實驗證實其具有解毒、保肝及抗腫瘤等相關活性作用。利用抗氧化物輔助營養或食品補充以減低ROS的產生會是減低長期肝發炎或是慢性肝發炎的策略之ㄧ。故本研究主要是以四氯化碳(CCl4)誘導大白鼠慢性肝損傷，探討不同牛樟芝子實體試驗樣品對於大白鼠慢性肝損傷之影響。研究成果顯示CCl4會造成肝臟組織外觀及病理組織破壞，肝損傷之大鼠其體重上升變化量變大， GOT、GPT、T-cholesterol、ALP、γ-GT表現量會上升，肝臟會產生纖維化，這和4HNE/Caspase-3/PARP介導的細胞凋亡有關，而在Silymarin治療組或牛樟芝子實體試驗樣品組皆可有效緩解CCl4引起的這些效應。這些結果表明，牛樟芝子實體可改善四氯化碳誘導的大鼠肝損傷，未來在輔助食品之應用上具有改善潛力。