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1. 探討TRIP6與IFIT5在神經膠質母細胞瘤中的交互作用 / 2. 海檬果萃取物對神經膠質母細胞瘤及其癌幹細胞的影響
(2018) 劉文善; Liu, Wen-Shan
I. 甲狀腺素受體作用蛋白質（tyroid receptor interacting protein 6, TRIP6）作為溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid, LPA）受體下游的影響目標，會調節細胞肌動蛋白質（actin），進一步影響細胞移動及細胞內部多重訊號傳遞。TRIP6目前已知在多型性神經膠質母細胞瘤（glioblastoma, GBM）有過度表現的現象，可能與GBM高度侵襲性有關。干擾素誘導四肽重複蛋白質5（interferon induced protein with tetratricopeptide repeats 5, IFIT5）為干擾誘導蛋白質家族的一員，參與人體先天性免疫反應。但有學者發現有部份獨立的IFIT5會與肌動蛋白質連結並表現在細胞膜上，可能與調控細胞移動有關。我們檢測IFIT5在多型性膠質母細胞瘤（glioblastoma, GBM）細胞中是否參與TRIP6調控的細胞遷移與腫瘤形成。本研究透過免疫共沉澱證實TIPR6與IFIT5在細胞中的確存在交互作用，並利用活細胞顯微影像追蹤兩者對細胞遷移的影響。我們發現IFIT5本身並不會增加細胞泡足的產生，但會增進TRIP6造成的細胞動態變化。 II. 多型性神經膠質母細胞瘤（Glioblastoma multiforme, GBM）是成人原發性腦癌中最常見的惡性腦瘤，被世界衛生組織（WHO）歸列為第四級神經膠質瘤。其具有高度侵潤性與異質性，對傳統化療及放射療法皆有抗性，因此許多病患在術後仍有很高的機率再復發，其存活率不超過14個月。部分學者認為，癌症復發與抗藥性可能與癌細胞中少部分的癌幹細胞有關，因此針對癌幹細胞作為治療策略亦是一重要方法。現今有諸多研究嘗試從植物中萃取成分，這些成分具有抗發炎、抗病蟲害或抗癌症之功能，進而研發出更多相似結構分子作為治療疾病的藥物。本文研究發現海檬果萃取物及neriifolin會抑制細胞生長及細胞遷移，並造成細胞週期停滯與細胞凋亡的發生。我們進一步探討neriifolin對神經膠質母細胞瘤類癌幹細胞的訊息路徑，發現neriifolin主要透過抑制Akt路徑活化而使細胞生長能力降低並抑制神經膠質母細胞瘤癌幹細胞的維持。
I. Trip6 蛋白質在小鼠腦中之表現 II. 建立人類惡性腫瘤之斑馬魚異體移植模式
(2014) 楊程堯; Cheng-Yao Yang
壹、 Trip6 蛋白質在小鼠腦中之表現甲狀腺素受體作用蛋白質 6 (Thyroid receptor-interacting protein 6, Trip6)是一種焦點連接(focal adhesion)分子，它調控一些細胞機制如：細胞之間的連接(cell adhesion)、細胞的遷移(cell migration)以及基因轉錄的活化 (gene transactivation)。過去研究指出 Trip6 屬於幹細胞性(stemness)的基因，在不同的幹細胞中具有較高的表現量。為了探究Trip6 在神經幹細胞所扮演的角色，我們分別檢測了 Trip6 蛋白質在胚胎與成年小鼠大腦中的表現量。發現 Trip6 的 mRNA 主要在胚胎小鼠的腦中有表現，但在成年小鼠腦中則比較低或偵測不到。其蛋白質也只可以在胚胎小鼠的大腦中被偵測到，成年小鼠則否。另外我們在胚胎與成年小鼠的大腦組織切片中，以不同的細胞標誌與 Trip6 進行組織免疫螢光染色。包括幹細胞的標誌 Sox2、增殖中細胞的標誌 Ki67、室管膜細胞的標誌 S100β、神經母細胞的標誌 DCX、神經元的標誌 MAP2、星狀細胞的標誌 GFAP 以及小膠質細胞的標誌(Iba1)。我們發現 Trip6 主要表達在胚胎小鼠的腦室區(ventricular zone, VZ)以及出生後小鼠的腦室下區(subventricular zone, SVZ)內的神經幹細胞(neural stem cells, NSC)中。這樣的結果支持Trip6 可能在調控幹細胞的特性中是一個重要的關鍵。貳、建立人類惡性腫瘤之斑馬魚異體移植模式神經膠質母細胞瘤是成人最常見且高侵略性的原發惡性腦腫瘤。它的侵襲力和耐傳統療法使其成為極易復發的惡性腫瘤。Rac蛋白質屬於Rho GTP酶亞家族，其主要功能包括調節細胞運動，增殖和存活。為了探究Rac蛋白質是否可以作為膠質母細胞瘤的新治療標靶，特別是對於神經膠質母細胞瘤幹細胞，我們利用其類癌幹細胞株建立了斑馬魚的異體移植模式來研究抑制Rac蛋白質對於神經膠質母細胞瘤的致癌性影響。我們將表達控制組的shRNA或者是針對Rac蛋白質做抑制的shRNA序列和綠螢光蛋白的神經膠質母細胞瘤細胞株U251-MG和U373-MG培養於低分化培養液中，以形成腫瘤細胞球(tumorspheroids)。這些體外培養的球體細胞有著幹細胞的特性。我們將這些細胞以顯微注射的方式注射進入受精後兩天大的血管紅螢光轉基因斑馬魚Tg(kdr: mCherry)的卵黃囊。觀察發現注入的癌細胞誘導了血管新生作用的發生，而表達shRacs細胞萎縮且並未引發血管新生作用。另外，注射shRacs細胞的魚隻生存率也較高。從我們的研究結果，Rac蛋白質會誘導膠質瘤幹細胞引發血管新生作用，並且可做為一個生物標誌。因此，Rac蛋白質可能可以進一步應用在神經膠質母細胞瘤的標靶治療上。另一方面，我們也利用注射肝癌細胞株Hep3B進入受精後兩天大的斑馬魚卵黃囊中，來觀察Hep3B細胞的遷移現象，此模式約有20%的魚隻可觀察到細胞遷移。
I.甲狀腺素受器作用蛋白質-6（TRIP6）及Rac2三磷酸鳥苷水解酶（Rac2 GTPase）在glioblastoma所扮演的角色 II.篩選新式化合物抑制大腸癌細胞DLD-1所衍生之類癌幹細胞之存活與增殖
(2020) 何幗瑛; HO, Kuo-Ying
I. 多型性神經膠質母細胞瘤（glioblastoma multiforme, GBM）是成人最常見且最具侵略性的原發性惡性腦腫瘤。它的侵略性和對傳統療法的抵抗性使其成為一種預後不良的高復發率惡性疾病。GBM中的膠質母細胞瘤幹細胞（glioblastoma stem cells, GSC）被認為與該病的抗性與復發有關。甲狀腺素受器作用蛋白質-6（Thyroid Hormone Receptor Interactor 6, TRIP6）是一種焦點附著分子（focal adhesion molecule），主要功能包括細胞運動、抗凋亡信號、轉錄控制和其他細胞反應。此外，我們還發現TRIP6是維持神經幹細胞的重要蛋白質。我們已知TRIP6在GBM細胞中高量表達，並且TRIP6的表現量高者其患者的預後愈差。然而在於腫瘤生成的過程中，TRIP6調控GBM的分子機制仍有進一步探討的空間。Rac三磷酸鳥苷水解酶（Rac GTPases）是Rho GTPases家族的成員。其主要功能是調節肌動蛋白（actin）細胞骨架的重組、細胞遷移、存活和凋亡。此外，我們亦發現Rac可調控神經膠質母細胞瘤類癌幹細胞的維持。前述所提到的兩個蛋白都與肌動蛋白及細胞的移動有關，因此TRIP6和Rac是否能交互調控維持腫瘤幹細胞的特性，以及TRIP6-Rac信號通路能否作為一種新的神經膠質瘤藥物靶點有待進一步研究。我們建立以干擾RNA將TRIP6表現量削弱後再額外表現Rac GTPase家族中Rac2的細胞株，檢測其衍生之類癌幹細胞增殖的能力發現，Rac2 應該作用於TRIP6下游，協助TRIP6調控神經膠質母細胞瘤類癌幹細胞的生長。 II. 大腸直腸癌亦簡稱為大腸癌，據2017年的報導，為世界上第三大被診斷出的惡性腫瘤，並為全球第四大的致死癌症。在台灣也是罹病人數最高的癌症，目前主要的治療方法為手術治療，再來是化學療法，但是大腸直腸癌在晚期的治癒率非常低，且經常在治療後復發與轉移。近年，許多癌症研究學者認為，癌症的預後不良與高機率的復發，是因為在腫瘤當中有一小群細胞具有幹細胞特性，稱為癌幹細胞。它們具有著自我更新、分裂與分化成癌細胞的能力，並認為這些細胞是造成癌症復發及癌細胞對藥物抗藥性的原因。為了篩選出有效抑制大腸癌細胞，尤其是大腸癌幹細胞增生的化學合成藥物，我們針對一系列吲哚合成化合物做大腸癌幹細胞的存活試驗。其中Gavin 05、Garvin14兩支藥物對大腸癌細胞DLD-1所衍生之類癌幹細胞中有抑制效果。為了進一步確認該藥物對於脊椎動物的毒性，我們利用了斑馬魚進行了毒性測試，結果發現隨著給藥時間越長，幼魚的心搏與控制組相比有明顯的下降，但其外表並無明顯畸形。
KIF12在大腸癌細胞中調控自噬作用與細胞外囊泡形成之角色
(2022) 陳麗年; Chen, Li-Nian
驅動蛋白家族成員 12（Kinesin Family Member 12；KIF12）是一種微管相關的運動蛋白，在細胞分裂及囊泡運輸中扮演重要角色。我們之前發現 KIF12 的表現量在大腸癌的組織比起正常組織有升高的現象，並且會促進大腸癌幹細胞的增殖。為更了解 KIF12 對大腸癌細胞的調控，我們進一步探討其對細胞自噬作用(autophagy)與外泌體(exosome)生成之影響。細胞中自噬作用泛指將細胞質內容物吞噬，形成自噬泡並送至溶酶體內降解的路徑，它的功能主要在於分解細胞內異常摺疊或堆積的蛋白質以及清除老化的胞器。細胞中自噬作用異常與癌症、神經及心血管退化性疾病形成皆有相關。外泌體是由內體(endosome)衍生的多囊泡體產生，包裹部分細胞內容物後分泌到細胞外。有研究指出外泌體的形成與自噬作用在維持細胞穩定及腫瘤細胞轉移中有協同作用。為深入探討 KIF12 是否調節大腸癌細胞以及其癌幹細胞自噬與外泌的能力，我們利用Lipofectamine 2000 將削弱 KIF12 的 shRNA 轉染至SW480(shKIF12)，並利用 CRISPR 系統建立剔除 KIF12 的穩定細胞株(CR-KIF12)，來探討 KIF12 對此二功能之影響。我們以 GFP-LC3融合蛋白質表現載體及酸性胞器染劑 Lysotracker red 來偵測細胞自噬作用。同時，我們利用外泌體的報告質體 PalmGRET reporter 來偵測細胞外泌體的生成與 KIF12 蛋白質之相關性。結果發現降低KIF12 的表現會抑制細胞因饑餓引發的自噬作用與外泌體生成。
Ⅰ、SCNN1B於大腸直腸癌類癌幹細胞之角色探討 / Ⅱ、建立藥物吸收之活細胞即時影像觀測系統
(2018) 林芷彤; Lin, Chih-Tung
Ⅰ、大腸直腸癌類癌幹細胞因子之探討大腸癌 (colorectal cancer, CRC) 又稱為大腸直腸癌或結腸直腸癌，由於其預後效果並不理想，即便經過治療，仍常發生轉移及復發的情形。「癌幹細胞 (cancer stem cells, CSCs)」為腫瘤細胞中極少部分類似幹細胞特性的細胞。然而這些細胞與腫瘤的發生、轉移、抗藥性以及復發擁有密切的關係。目前常用於辨識癌幹細胞的生物標記，如：CD133、CD44等，但這些生物標記仍備受爭議。本研究中我們利用腫瘤病人的新鮮檢體培養得來之貼盤細胞與懸浮細胞球(tumorsphere) 進行微陣列分析 (microarray assay)，實驗結果發現SCNN1B基因的表現量在類癌幹細胞中有較一般癌細胞多的趨勢；且在大腸癌細胞株的繼代培養中亦觀察到相同的現象。因此，我們期望透過研究SCNN1B對大腸癌幹細胞 (colorectal cancer stem cells, CRCSCs) 的影響，藉以找出大腸癌治療標靶的新穎生物標記。 Ⅱ、建立藥物吸收之活細胞即時影像觀測系統一直以來，在臨床上給予藥物最常用的方式是口服給藥，因為口服給藥是最為經濟且安全的，並被認為是病患對於藥物吸收最理想的方式，口服給藥的方式藥物會通過腸道吸收以及血管運送進入人體循環，上皮細胞對於藥物的吸收程度以及藥物對於內皮細胞的穿透能力，被認為是對於藥效影響的指標。目前在臨床研究上有許多方法可以用來偵測藥物在體內以及體外的吸收程度，但這些方法大部分是建立在間接的化學分析或者物理波長的吸光度測定上，因此本研究透過建立一個活細胞即時影像系統，觀察藥物吸收以及藥物進入細胞的過程。利用計算藥物螢光的強度，我們可以偵測藥物或生物活性配方的吸收效率，而我們也成功的在加藥半小時內觀察到薑黃素在Caco-2細胞的吸收情形。此外，我們也觀察到經過高速均質後的薑黃素乳化劑吸收的效率比單純脂質包裹的薑黃素來得高。
大腸癌幹細胞新穎標記之研究
(2017) 李丹玉; Lee, Tan-Yu
摘要大腸直腸癌是世界上最常見的癌症之一。雖現已研發出一些新治療方式及策略，但對大多數中晚期階段的患者而言，預後狀況仍不樂觀。近年來的研究發現有一小群具有類似幹細胞特性的腫瘤細胞，稱為癌幹細胞，與腫瘤的生成、復發、轉移及對化學放射治療產生抗性有主要關係。因此，能夠找出具專一辨識性的大腸癌幹細胞生物標記是非常切要的。CD133是目前相當普遍被用來辨識和分離癌幹細胞的一種生物標記，但對於其能否作為大腸癌幹細胞的辨識標記仍存有許多爭議，所以我們想要找出其它更專一的大腸癌幹細胞生物標記。目前我們收集了102個中晚期階段不同病人手術切下的腫瘤檢體進行初級細胞培養，包括培養出腫瘤球（tumorspheres）與貼盤細胞然後與原來的組織塊一起做mRNA分析，希望能藉此找出與大腸癌幹細胞密切相關的因子。我們篩選出最能以癌幹細胞球繼代培養的2811細胞株，抽取其懸浮培養的腫瘤球及貼盤細胞之RNA，和2901的新鮮腫瘤組織塊之RNA去進行 microarray分析比較。發現驅動蛋白12 （Kinesin Family Member 12, KIF12）基因的mRNA表現量在懸浮培養的腫瘤球內比起貼盤培養的細胞與腫瘤組織塊要高。我們接著在其他臨床檢體的初級培養細胞中檢測KIF12的mRNA及蛋白質的表現量，結果顯示KIF12的mRNA含量在4株我們初級培養出的人類大腸癌類癌幹細胞中的表現量確實比較高。另外，利用人類大腸癌細胞株HCT-116及HT-29衍生出之類癌幹細胞球亦有同樣的結果。然而，利用Western blot分析其蛋白質表現的結果顯示，KIF12蛋白質在HT-29的類癌幹細胞球中比起貼附的癌細胞確實有明顯升高，但在HCT-116中卻相反。因HT-29與HCT-116細胞株主要差別為HT-29為p53突變之細胞，因此KIF12之表現量與p53之關聯尚須更多研究。根據以上結果，我們希望探討利用KIF12作為大腸癌幹細胞的生物標記之可能性，期望未來能夠提供臨床醫療應用。
干擾素誘導四肽重複蛋白5 (IFIT5) 在神經膠質母細胞瘤的細胞增殖與移動所扮演的角色
(2021) 陳亭均; Chen, Ting-Chun
多型性神經膠質母細胞瘤 (Glioblastoma multiforme，GBM) 是成人最常見且最為惡性的原發性腦癌，以高復發率和低5年生存率著稱，目前還沒有發現有效的治療方法。現在主要的治療方式是以手術切除合併化療和放射治療。之前研究表明，神經膠質母細胞瘤之癌幹細胞 (Glioblastoma stem cells, GSCs) ，與腫瘤之增生、轉移、抗藥性及預後復發有關。若能針對調控神經膠質母細胞瘤之癌幹細胞(GSCs)的生長維持機制，找出抑制腫瘤生長的方法，將會是治療多型性神經膠質母細胞瘤(GBM)的新方法。IFIT5 (Interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 5)是IFIT protein家族的一員，為細胞在病毒防禦上的重要蛋白質。IFIT5在細胞表面肌動蛋白絲(actin)豐富處表現。實驗室之前的研究使用OncoLnc分析TCGA資料庫發現不論在神經膠質母細胞瘤或其他低程度神經膠質瘤中，高表現IFIT5的患者有較低的整體存活率。為研究IFIT5在神經膠質母細胞瘤的功能，本實驗利用U87-MG此種多型性神經膠質母細胞瘤及其過度表現IFIT5的細胞株發現，過度表現IFIT5會抑制多型性神經膠質母細胞瘤及其癌幹細胞的增殖和移動能力。
探討TRIP6與IFIT5之交互作用於細胞中扮演之角色
(2019) 林栩茵; Lam, Hoi-Ian
多型性神經膠質母細胞瘤（Glioblastoma multiforme, GBM）是惡性且侵潤性高的原發性腦瘤，目前臨床上仍無法完全根治。因此，瞭解其細胞遷移及浸潤機制，有助於透過有效抑制腫瘤浸潤能力，減少GBM侵襲正常腦組織而達到提高患者的存活率。細胞點狀黏著分子TRIP6（Thyroid receptor-interacting protein 6）和干擾素誘導蛋白質IFIT5（Interferon Induced Proteins with Tetratricopeptide Repeats 5），兩者都被研究出可調控肌動蛋白質及活化發炎因子NF-κB，而實驗室在之前的研究中已發現TRIP6和IFIT5之間會有交互作用。為深入了解此交互作用是否影響此二蛋白質在細胞中的功能，本研究首先探討TRIP6與IFIT5之結合位置。結果顯示TRIP6的C端負責與IFIT5進行交互作用並促進IFIT5共聚到肌動蛋白質形成之壓力絲上。我們進一步透過拍攝細胞移動變化影像得知，IFIT5與TRIP6皆會促進細胞的動態變化。利用傷口復原法檢測細胞移動之能力，發現IFIT5雖促進細胞之形變卻無法促進細胞移動，反而有抑制之趨勢，並抑制TRIP6促進之細胞移動現象。但若只有過表現TRIP6之C端與IFIT5，IFIT5抑制現象反而減弱，因此TRIP6之C端可能與內生的TRIP6競爭IFIT5，降低IFIT5抑制內生型TRIP6的作用。由這些結果可知，對GBM患者IFIT5可能具抑制細胞移動的作用，從而降低細胞的侵略性而使病人存活率增加。
探討具有保護正常細胞免於順鉑毒殺作用的中草藥
(2019) 陳信益; Chen, Hsin-Yi
順鉑為最常用於治療癌症的化學治療藥物，但具有腎臟毒性和神經毒性。因此，找到能夠與順鉑協同抑制癌細胞生長，又能降低順鉑對正常細胞毒性(特別是神經細胞)的藥物是很重要的。中草藥在中國已被廣泛使用數千年，其藥效相較於西藥來得溫和，現今也有研究指稱它具有保護正常細胞免於化療藥物的毒殺效果。因此，我們以肝癌細胞株Hep3B和卵巢癌細胞株SKOV3建立癌症模型，並使用神經瘤細胞株SH-SY5Y建立神經細胞平台，以篩選可保護神經細胞免於順鉑毒殺作用的中草藥萃取物。初步篩選後，茯苓及天麻兩種中草藥萃取物能夠抑制Hep3B和SKOV3的生長，並且對於經維生素A酸刺激分化過的神經母細胞瘤SH-SY5Y細胞沒有毒性。根據以上實驗結果，茯苓及天麻可望成為與順鉑一起作用的複方，並期許其未來可應用於臨床治療。
探討小分子C-2對Protein-X促進amyloid beta寡聚合及細胞毒性之研究
(2020) 王亮博; Wang, Liang-Bo
阿茲海默氏症（Alzheimer’s disease, AD）已被視為常見的神經退化性疾病，主要病因為海馬迴的神經元受損，同時也引起認知功能障礙的出現。AD特徵包括由細胞內蛋白tau過度磷酸化所造成的神經纖維糾結（neurofibrillary tangles, NFTs）及細胞外類澱粉蛋白-β肽（β-amyloid peptide, Aβ）聚集形成的類澱粉斑塊（plaques）。目前，我們實驗室已發現，與年幼的小鼠相比，年老的AD模式鼠具有較高表現量的X蛋白。為了更進一步了解X蛋白在AD中的作用機制，我們藉由轉殖入X蛋白的SH-SY5Y細胞株作為本實驗使用的模式細胞。在細胞存活率方面以及西方墨點法的實驗中，從寡聚合物Aβ42中處理的細胞組別可以得知，經X蛋白的給予後會產生更多Aβ的聚集，使得細胞存活率降低，而處理小分子藥物的C-2能有效降低X蛋白所給予出的Aβ，進而達到拯救細胞的效果。因此，我們認為C-2可能透過抑制X蛋白而有效治療AD的小分子藥物。
探討間葉幹細胞在以N-nitrosodimethylamine誘發成肝炎、肝纖維化及肝癌之大鼠體內的生理、病理角色
(2017) 賴怡安; Lai, Yi-An
在台灣、亞洲及南非地區肝細胞癌是最嚴重的癌症。由於肝癌無論是手術治療或非手術治療，其治療效果均與腫瘤期別有密切關係，因此早期診斷、早期治療是非常重要的。然而高達80％的原發性肝細胞癌病人於五年內會再併發復發性肝細胞癌，其再復發的機制至今仍不十分清楚。因此對於肝癌之形成機轉、復發原因與預防或治療方式之探究是至為重要的。隨著不同時期和程度的肝損傷，過度的活性氧(reactive oxygen species, ROS) 如O2˙-、H2O2 以及NO會造成脂質過氧化(lipid peroxidation)、蛋白質氧化(protein oxidation)、DNA損傷(DNA damage) 與突變產生(mutagenesis)。這些活性氧(reactive oxygen species, ROS)d可能主要來自肝細胞之粒線體、活化的巨噬細胞(activated macrophages, 或稱Kupffer cells)與入侵之中性球(infiltrating neutrophils)。活性氧(reactive oxygen species, ROS)會啟動細胞核因子nuclear factor-kappa B (NF-kB) 與activator protein-1 (AP-1) 移位至細胞核而造成許多發炎細胞激素的釋放引起發炎。過量活性氧(reactive oxygen species, ROS)透過Kupffer cell內的 NADPH oxidase 或是肝細胞之cytochrome P4502E1 (CYP2E1) 會促進肝臟內之stellate cells 活化而造成肝纖維化與肝癌。肝損傷時肝臟內許多細胞受原位細胞或發炎細胞氧化壓力增加引起Bax/Bcl-2 family啟動細胞凋亡 (apoptosis)、caspase 1/IL-1調節之發炎性細胞死亡(pyroptosis)或Beclin-1/LC-3β調節之細胞自噬 (autophagy)造成肝功能損傷進而形成肝腫瘤。間葉幹細胞(MSC)具有極佳自我更新（self-renewal）及增生（proliferation）能力，MSC同時也具有旁分泌（paracrine）的功能，其培養基(CM)中可能含有高量的growth factors、cytokines及prostaglandins。這些物質會增加細胞增生、存活及血管生成而提升組織修復。為探究MSC之治療效益，我們利用以N-nitrosodiethylamine (DEN)刺激肝發炎、硬化與腫瘤之大鼠動物模式，評估MSC給予對DEN誘發肝發炎、硬化與腫瘤之病理生理效應。研究發現靜脈給予MSC後，其主要匯集於受傷的肝臟組織。另外，MSC的給予改善DEN引起之肝發炎、硬化與腫瘤等病理特徵，包括降低Masson染色之損傷指標、細胞凋亡、細胞自噬，發炎性細胞死亡表現，並降低肝功能AST與ALT之數值。綜合研究結果，MSC有相當之潛力發展成為對肝損傷患者之細胞治療製劑。
新穎化合物Gavin 08抑制人類多型性神經膠質母細胞瘤癌幹細胞之增殖與存活
(2020) 慕庭如; Ting-Ru Mu
多型性神經膠質母細胞瘤（glioblastoma multiforme, GBM）是最常見的原發性腦瘤，它的高度侵略性使GBM成為預後不良以及復發率高的疾病。傳統的治療為手術輔以放射線及化療為主，但並無法有效根治。目前主要化療藥物Temozolomide (TMZ)在初期可以有效的抑制腦癌細胞的存活率，但因病人常對TMZ產生抗藥性，因此科學家們還在積極尋找其他具有療效的化療藥物。已經有許多研究指出，在癌細胞中之癌幹細胞（cancer stem cells, CSCs）具有特殊蛋白質通道能將化療藥物排出細胞外，對癌症的抗藥性及復發都有很大的關聯性。為了找出可以有效抑制腦癌幹細胞生長的藥物，我們檢測吲哚類的化合藥物是否能夠抑制腦癌類癌幹細胞的增殖。結果顯示Gavin 08可以有效降低腦癌類幹細胞的增殖能力使細胞週期停滯，並且促進細胞凋亡。因此，我們認為Gavin 08可以降低腦癌細胞的增殖與存活，具成為新穎化療藥物的潛力。
檢測UV-C LED抑制細菌及病毒之功效及建立檢測方法
(2023) 許庭維; HSU, Ting-Wei
在日常生活中，四處含有致病菌株，當菌量少時可能對人沒特別影響，但菌量多的時候可能會引發疾病產生。近年來世界受到COVID-19的影響，因此消毒殺菌就顯得很重要。儘管目前疫情有減緩的趨勢，但並未完全消除COVID-19的威脅，加上擔心其他潛在的危險微生物，因此發展有效抑制細菌及病毒活性之日常消毒方法就顯得相當重要。本研究使用南亞光電提供之UV-C LED燈管進行其抑制致病菌株與病毒之確效實驗測試，檢測對象包括致病菌株 (大腸桿菌、產氣單胞菌、金黃色葡萄球菌ATCC 33591、綠膿桿菌ATCC 15442、克雷伯氏肺炎菌ATCC 10031)及腺相關病毒(adeno-associated virus，AAV)與慢病毒 (Lenti-virus)來進行活性抑制測試。測試結果顯示，在革蘭氏陰性菌方面，UV-C LED在照射距離110公分內約5-15分鐘可對大腸桿菌、親水性產氣單胞菌及綠膿桿菌可達到約90%以上的抑制效果。而克雷伯氏肺炎菌在照射距離110公分內1分鐘即可達到80%以上抑制效果。另外在革蘭氏陽性菌的金黃色葡萄球菌中，照射距離15公分射5分鐘可達到近60%抑制效果。在病毒方面，對沒有套膜的腺相關病毒在照射距離30公分內15分鐘可達80%抑制效果，對有套膜的慢病毒則在相同的照射距離下30分鐘達到約60%抑制效果。本研究建立一適用於一般實驗室之微生物抑制效果檢測方法，方便初步檢測未確效之新設備。
由中華民國外交與僑務政策看美國僑報反應（1965-1991）
(2011) 賴韻如
本論文討論在冷戰背景之下，在臺灣、中國大陸與美國關係的轉變情形時，以中華民國退出聯合國、臺灣與美國斷交，以及1980年代臺灣與中國大陸發生的人權時間為觀察重點，觀察中華民國的僑務與外交政策如何改變，美國僑報又是如何看待這些變化，這些變化如何影響美國華僑政治態度的改變情形。除緒論與結論外，本研究分為四章。第二章首先討論冷戰框架下，中華民國、美國與中國大陸之間的關係。冷戰期間，國際局勢是自由世界與共產主義陣營之間長期的對抗，美國為了對抗蘇聯以及戰略需求，幫助在臺灣的中華民國政府，換句話說，美國的對華政策都離不開蘇聯。1960年代華人對居住國的心態從落葉歸根到落地生根。介紹中華民國政府的外交與僑務政策形成的背景因素。第三章則是探討退出聯合國事件對僑社的衝擊。中華民國政府透過刊登大篇幅廣告與僑社署名，來強調中華民國的正統性。親中華民國與中華人民共和國僑報出現截然不同的反應，親中華民國的僑報氣憤難平，親中華人民共和國的僑報卻是認為正義獲得伸張，兩方的交鋒更延伸到國慶典禮與尊敬孔子與否的爭議之中。第四章則是討論中美斷交前後美國僑社政治態度的變化。在中華民國退出聯合國後，中國大陸開始大力推行「和平統一」的政策，大打宣傳戰，攻擊蔣家政權，甚至特意關注臺灣人團體的活動，中華民國政府如何因應此局面，如何回應中國大陸的宣傳戰；1979年中美斷交後，雖有《臺灣關係法》的通過，對於華僑而言，仍是一大衝擊，中華民國政府也在中美斷交後，更加積極推動僑務工作，希望透過海外學人、留學生達到影響美國政界的目的。中國大陸宣傳開始強調中國是美國華人的娘家，美國才是婆家，因此在婆家好好生活才是首要之務，這樣的說法正符合當時候美國華人的心態，吸引很多人的注意。第五章主要討論1980年代中華民國與中國大陸在國際形象上兩方都遇到挫折，1980年代初的陳文成案與江南案，重創中華民國「自由民主」國家的形象，也使得重視人權議題的美國對中華民國反感，造成華僑受到居住國—美國的影響，連帶對中華民國的政治態度也產生衝擊，而此時中華民國政府卻無法整合僑社，造成中華民國在美國僑社的影響力也產生變化；而中國大陸在1970年代末期，鄧小平上臺，採取「改革開放」路線，中國的經濟能力大幅提昇，因此移入美國的華僑也增加許多。但1989年的天安門事件，中國大陸血腥鎮壓學生，造成國際社會譁然，尤其衝擊自詡為「世界英雄」的人權國家—美國，美國的中國留學生與偏向中華民國的社團結合，向中國大陸示威遊行、表達抗議，僑社因為天安門事件對中國大陸的觀感改變，但卻未改變對中國的認同。在結論的部份，提出以下論述。中華民國的僑務與外交政策在冷戰氛圍夏是相當被動的，但在被動中仍有其積極性，試圖在美中臺三角關係中力圖振作、積極宣傳，但是因為國際關係與華僑心態的改變，成效並不明顯。華僑出外謀生是相當具有現實性的，華僑的政治態度依照現實而有所改變，也是無法避免的趨勢。因此中華民國的外交與僑務政策必須因時調整，僑務工作可以在既有的僑務經濟策略上，進一步順應全球化時代著重經濟投資與科技研發的趨勢，一方面以臺灣作為連結世界各地僑團商會的基地，再繼續拓展橫向聯繫，形成一緊密網絡，利用經濟力擴大臺灣的影響力及外交空間。
研究中草藥S10對多形性神經膠質母細胞瘤及其類癌幹細胞之存活抑制作用
(2017) 吳孟蒔; Wu, Meng-Shih
Glioblastoma (GBM) 是腦癌中常見的一種惡性腫瘤，現有的治療方式多以手術切除搭配化療進行，但現有的治療方式成效不彰，且由於GBM具有高度侵入性，因此預後大多不佳，現有藥物對其療效也有限。中草藥應用在中國傳統醫學治療長達數千年之久，但比起西方藥物，其研究相對較少，近年來也開始有研究指出中草藥對某些癌症細胞具有毒殺效果，因此我們也期望能從中發展出治療GBM的有效藥物。本篇研究中，我們使用 Human GBM cell line U251-MG 和 U373-MG，利用順天堂藥廠股份有限公司提供之水萃中草藥，篩選出具有抑癌成效的中草藥，另外也使用U251-MG衍生之類癌幹細胞以及利用CD133標記分離出之CD133+ 癌幹細胞，進一步的確認中草藥抑制癌幹細胞的效果。在我們的研究中發現，中草藥水萃物S10不僅對GBM癌細胞及類癌幹細胞的生長有抑制效果，同樣也能有效抑制CD133+ 的GBM癌幹細胞生長，而且S10並不會對正常小鼠星狀膠細胞的生長造成影響。另外，在分子機制上，我們用西方墨點法證明了S10會降低Akt及ERK的活化，並有效降低幹細胞相關蛋白質CD133及Sox2的表現。此外，為了研究S10在活體模式的效果，我們使用NOD.CB17-PrKdC-SCID/Jnarl 免疫缺陷小鼠異種移植U373-CD133+ 衍生之類癌幹細胞並發現 S10可以抑制腫瘤之形成與生長。而將長出的腫瘤取出體外，進行初級細胞培養後，也能看到給予藥物的組別，其形成群落的能力比控制組來的差。我們更進一步探討S10中的有效成分，其中S10-I2與S10相同皆可有效抑制GBM癌細胞及其類癌幹細胞的存活，並減少GBM的癌幹細胞特性，降低Akt與ERK的活化。S10-I2對初級培養的正常小鼠星狀膠細胞亦無毒性，後續若能釐清S10-I2之詳細作用機轉，以及在活體內的效果，將提升S10-I2在臨床應用上的可能。
篩選抑制神經膠母細胞瘤之中草藥
(2014) 蔡瑞真; Jui-Cheng Tsai
多型性神經膠母細胞瘤 (GBM) 是最常見且惡性的原生性腦瘤。造成膠質母細胞瘤的原因目前還不明瞭，而現行的治療方法為結合手術、放射線與化學治療，但由於它具有高度的浸潤能力，以及對於放射線與化學治療的抵抗能力，造成疾病難以治癒並容易產生復發的狀況，這些可能是由多型性神經膠母細胞瘤的癌幹細胞引起的，故針對癌幹細胞為標靶可能是多型性膠母細胞瘤合適的治療方法。中草藥這個傳統的治療方法已在中國流傳千年之久，現今它不僅治療疾病，亦成為前景看好之生物技術產品。為了研究中草藥萃取物是否可以當作治療多型性神經膠母細胞瘤的潛力藥物，我們建立膠質母細胞瘤衍生之球細胞篩選平台，以此篩選四百種中草藥萃取物中可以有效抑制膠質母細胞瘤的細胞株的生長或存活之中草藥。目前已篩選出三種具潛力的藥物，可以有效抑制膠質母細胞瘤生長，但對於非轉型的正常細胞毒性較低。另外這些萃取物也會影響細胞移動的能力，並調控細胞ERK與AKT的訊息傳導、細胞週期與自噬作用等。另外，這些萃取物會更進一步抑制癌幹細胞的標記的表現。綜上所述，我們建立了一個多型性神經膠母細胞瘤的中草藥萃取物篩選平台，並篩選出三個有效抑制多型性神經膠母細胞瘤之萃取物，期望未來可發展為具潛力之候選藥物。
篩選有效對抗神經膠質母細胞瘤癌幹細胞之植物酒萃物
(2016) 曾盈婷; Tesng, Ying-Ting
多型性神經膠質母細胞瘤(Glioblastoma multiforme，GBM)為成人中最常見且惡性的致命性原生腦癌，被世界衛生組織(WHO)歸列為第四級神經膠質瘤。多型性神經膠質母細胞瘤(GBM)具有高度異質性與侵略性，並對於傳統的化學及放射治療有抗藥性，因此多型性神經膠質母細胞瘤(GBM)之病患即使經過治療，仍有極高機率會復發，故其平均存活率不超過16個月。而此現象可能與GBM之癌幹細胞密切相關，因此針對癌幹細胞做為治療GBM的策略為一重要之目標及方向。中草藥在中國已被廣泛使用數千年，現今則有研究指稱它具有治療某些癌症疾病的潛能。因此，我們以腦癌細胞株U251-MG及U373-MG及其衍生之tumorsphere建立篩藥平台，以篩選可抑制GBM生長之有效中草藥萃取物。我們從200種中草藥酒萃物中篩選出兩種中草藥萃取物可抑制U251及U373 tumorsphere之存活，但對於正常的老鼠星狀膠細胞毒性較低。此兩種萃取物可能藉由調控Akt或ERK之訊息傳遞路徑，並影響細胞週期而達到抑制細胞生長，另外它們可降低幹細胞標記—CD133或Sox2之表現。此外，我們發現化合物BS可能是IT229中有效對抗GBM幹細胞之有效成分，其可有效降低U373-tumorsphere之存活。綜上所述，此兩種中草藥萃取物可能為有潛能治療GBM之藥物，並期許其未來可應用於臨床治療上。
鷹架式探究課程對學生心智模式和科學解釋之影響：以板塊構造學說為例
(2009) 賴韻如
本研究以準實驗研究法探討不同鷹架設計之教材對於學生心智模式和科學解釋之影響差異。研究對象為臺北市立某高級中學一年級之學生，有效樣本共81人。研究工具為鷹架式探究課程、學習單、晤談單、開放式問答測驗等。整體而言，全體學生在課程前後學生對地球內部結構的概念並無顯著差異，但對板塊運動動力來源和臺灣附近地體構造等的心智模式皆達顯著差異。此結果可能與課程中所使用地震軟體做為視覺輔助之鷹架有關，因為地震軟體可將抽象的板塊運動概念視覺化、具體化，以幫助學生理解。在科學解釋部分，學生除了說明主張並未達顯著外，在提出證據、推理解釋及綜合科學解釋上皆於課程結束後顯著進步。將學生分成兩組實驗組，分別接受本研究所設計之兩種不同鷹架的教材進行教學實驗，研究結果顯示兩組學生在地球內部結構和板塊運動動力來源的心智模式、說明主張皆無顯著差異；但是，兩組學生在臺灣附近的地體構造的心智模式、提出證據、推理解釋以及綜合科學解釋等皆達顯著差異，即接受完整鷹架教學之學生，進步幅度高於接受簡單鷹架教學之組別，主要是因為完整鷹架的教材中的學習單所提供之文字提示能將學習任務由簡單到複雜逐步引導學生完成探究，並且能夠輔助學生理解視覺軟體(地震軟體)中的表徵意義及其背後的科學意涵。