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Item 山苦瓜活性物質TCD抑制人類胃癌細胞增生之作用機轉(2019) 駱曉彤; Lok, Hio-Tong動機: 先前文獻報導葫蘆烷三萜類化合物能抑制乳癌、子宮頸癌及前列腺癌細胞增生，具抗腫瘤的潛力。本研究室先前證實一種葫蘆烷三萜類化合物3β, 7β, 25-trihydroxycucurbita-5, 23-dien-19-al (TCD)能延滯細胞週期、引起細胞凋亡而抑制人類胃癌細胞株AGS細胞增生。然而其作用機轉未明，因此本研究接續探討TCD對於人類胃癌細胞株(AGS、MKN28、MKN45)增生的抑制效應及其誘導細胞凋亡之分子機制。 方法: 使用MTT測定TCD處理對於AGS、MKN45、MKN28存活率的影響。以流式細胞儀和西方墨點分析TCD處理AGS細胞對於細胞週期與細胞凋亡之相關蛋白表現量的影響。另外以西方墨點分析內質網壓力相關蛋白(GRP78 、p-PERK、IRE-1、XBP-1、ATF4、CHOP、p-JNK)的變化。 結果: 本實驗結果發現TCD可抑制胃癌細胞株AGS、MKN28、MKN45的增生，其IC50值分別為41, 40 和 45 μM。以TCD (30 μM)處理AGS細胞24 小時後，發現TCD經由抑制Cyclin E、Cyclin D1、CDK2、CDK4和p-Rb蛋白表現，造成細胞週期停滯於G1期。經TCD(30μM，24小時) 處理後顯著提升GRP78蛋白表現，激活未折疊蛋白反應中p-PERK、ATF-4、CHOP、p-JNK，抑制抗凋亡蛋白Bcl-2及激活凋亡蛋白Bax，活化下游 cleaved caspase 9、cleaved caspase 3和 cleaved PARP，而引起細胞凋亡。另 TCD亦可促使MKN28和MKN45細胞的提升GRP78蛋白表現，推測亦可激活這兩株細胞的未折疊蛋白反應、引起內質網壓力。以外，從MTT細胞存活分析結果發現化療藥物SN38和TCD以等比例(AGS --1:200，MKN45--1:2000，MKN28--1:300) ，合併使用時，能有效抑制AGS、MKN28和MKN45細胞增生，分別具協同 (synergism)或加成(additive)作用。 結論: 由上述結果推論TCD可經由延滯細胞週期、引起內質網壓力導致細胞凋亡而抑制胃癌AGS細胞增生，具抗胃癌的潛力 。而TCD與SN38併用可協同或加成性的抑制胃癌細胞株增殖，推測TCD具有增強化療藥物作用的潛力，但仍待未來更多研究證實。