學位論文

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    利用斑馬魚胚胎模式研究烯酸酯類殺菌劑pyraclostrobin 之毒性
    (2023) 葉凡瑄; Yeh, Fan-Hsuan
    百克敏(pyraclostrobin)是一種被大量使用的農業除真菌劑，透過地表徑流等途徑汙染環境，在世界各地的水域已被檢出。其對於水生生物包括魚類以及兩棲類，具有極高的非專一毒性。先前研究證實百克敏對於斑馬魚具有粒線體毒性、心毒性並造成發育延遲、增加氧化壓力、降低活動力。但對魚類其他生理功能的影響仍不清楚。本研究利用斑馬魚胚胎作爲毒理模式，將其曝露於100-1000 ppb的百克敏96小時後，觀察其對於基因表現、離子調節、側線感覺功能的變化；曝露百克敏120小時後，觀察聽覺與視覺行爲的改變。並利用轉基因螢光魚觀察中樞神經系統的影響。結果顯示百克敏96小時半致死濃度為204.6 ppb。濃度≥100 ppb 造成心率下降、側線毛細胞損傷、觸碰逃跑速度下降；濃度≥150 ppb造成體長降低，眼睛、耳石囊、耳石面積變小，卵黃消耗減少，體内Ca2+、K+離子含量下降，離子細胞數目減少；濃度200 ppb造成圍心腔水腫、皮膚幹細胞減少以及側線毛細胞減少。利用RNA定序分析基因表現發現許多異常包括:離子調節(atp1a1a, atp2b,atp6v, kcnj1a, rhcg)、側線感覺(cib2, myo6b, s100)、粒線體電子傳遞鏈(cytb, cox3、cox19)、內耳感覺(otomp, cep290, oc90)、視覺(cabp5a, clcc1)、細胞凋亡(casp3, casp8, casp17)等相關基因。在行為實驗發現，百克敏會降低聲音驚嚇反應之敏感度，並延長視覺運動反應時間。螢光魚的結果顯示，百克敏會造成脊髓運動神經元減少。綜上所述，本研究提出百克敏可能會造成魚類離子調節、周邊感覺(側線、視覺、聽覺)以及中樞神經異常，對魚類生存造成威脅，需更審慎評估百克敏的使用。
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    汞對於斑馬魚仔魚側線感覺與離子調節功能之影響
    (2018) 潘予芹; Pan, Yu-Chin
    汞（Hg）是一種具高毒性的重金屬，非常容易藉由生物累積的方式進入食物鏈。其毒性取決於他的化學結構、接觸途徑以及物種，目前已有許多在人體及哺乳類動物實驗中，證明長期暴露在汞確實會造成損傷，即使是在低濃度下仍有極高的風險。先前對於汞造成斑馬魚影響的研究相當多，主題大多著重在汞對於斑馬魚胚胎時期神經與腦部發育的影響，較少去探討孵化後仔魚暴露在含汞的環境下，其皮表的離子細胞以及毛細胞的影響。本實驗利用斑馬魚仔魚作為模式物種，分別暴露於短時間（4 hrs）與長時間（48 hrs）含汞（氯化汞、甲基汞）的水體當中，觀察仔魚表皮的毛細胞與離子細胞；這兩型細胞分別負責機械性感受器的功能、排酸功能。短時間暴露於氯化汞和甲基汞後，導致仔魚表皮之毛細胞與離子細胞的細胞數目與功能下降；進而觀察到仔魚逆流行為、活動力以及體內鈣和鈉含量下降。長時間暴露後，於較低的濃度即可觀察到汞所造成的影響，包括細胞數目與功能的下降、逆流行為、體內離子含量及基因表現量的改變。另外，於本實驗我們也觀察到氯化汞與甲基汞所造成的毒性不盡相同。