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    臺灣一位Hurler型黏多醣儲積症(MPS IH)患者的IDUA基因突變分析及記述
    (國立臺灣師範大學研究發展處, 2000-04-??) 鄧燕妮; 李桂楨; 王作仁; 胡務亮; Yen-Ni Teng, Guey-Jen Lee-Chen, Tso-Ren Wang ,and Tuh-Liang Hwu
    研究的目的在檢視臺灣一位Hurler型黏多醣儲積症(MPS IH)患者的α-L-iduronidase(IDUA)基因突變。首先利用和IDUA基因序列互補的寡核甘酸引子及聚合鋂鏈反應(PCR)，放大包含此基因各表現子片段；經洋菜膠體電泳檢查後，進行單股核酸構形多型性(SSCP)分析，以初步篩檢突變。再進一步將異常大小或構形的表現子片段選殖定序，以檢測患者的基因突變。結果發現患者為表現子9的異型合子突變，其對偶基因1上第1447-1473 cDNA序列發生缺失(1447del27)，造成9個胺基酸的缺失及第453個胺基酸由絲胺酸(Ser)轉變為精胺酸(Arg)；對偶基因2上的第1474個cDNA序列則發生15個核甘酸的插入(1474insl5)，造成5個胺基酸的插入。進一步構築僅含上述突變點的IDUA cDNA 重組質體，並經lipofection的方式轉移入COS-7細胞中表現後，含1447del27、1474insl5變異的IDUA重組質體轉移細胞所表現的酵素活性僅為野生型之0.1%、0.3%。北方吸漬(northern blot)分析顯示，含1447del27、1474ins15變異的重組質體轉移細胞所表現的IDUAmRNA量，分別為野生型之24%、49%。西方吸漬(western blot)分析顯示，重組質體轉移細胞所表現的突變的IDUA蛋白質，在IDUA多株抗體偵測的底限之下。本實驗結果顯示，此病人在表現子9的缺失及插入突變，影響IDUA酵素活性，造成患者臨床上嚴重的性狀。
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    臺灣一位Hurler型黏多醣儲積症(MPS IH)患者的IDUA基因突變分析及記述
    (國立臺灣師範大學研究發展處, 2000-04-??-) 鄧燕妮; 李桂楨; 王作仁; 胡務亮; Yen-Ni Teng, Guey-Jen Lee-Chen, Tso-Ren Wang ,and Tuh-Liang Hwu
    研究的目的在檢視臺灣一位Hurler型黏多醣儲積症(MPS IH)患者的α-L-iduronidase(IDUA)基因突變。首先利用和IDUA基因序列互補的寡核甘酸引子及聚合鋂鏈反應(PCR)，放大包含此基因各表現子片段；經洋菜膠體電泳檢查後，進行單股核酸構形多型性(SSCP)分析，以初步篩檢突變。再進一步將異常大小或構形的表現子片段選殖定序，以檢測患者的基因突變。結果發現患者為表現子9的異型合子突變，其對偶基因1上第1447-1473 cDNA序列發生缺失(1447del27)，造成9個胺基酸的缺失及第453個胺基酸由絲胺酸(Ser)轉變為精胺酸(Arg)；對偶基因2上的第1474個cDNA序列則發生15個核甘酸的插入(1474insl5)，造成5個胺基酸的插入。進一步構築僅含上述突變點的IDUA cDNA 重組質體，並經lipofection的方式轉移入COS-7細胞中表現後，含1447del27、1474insl5變異的IDUA重組質體轉移細胞所表現的酵素活性僅為野生型之0.1%、0.3%。北方吸漬(northern blot)分析顯示，含1447del27、1474ins15變異的重組質體轉移細胞所表現的IDUAmRNA量，分別為野生型之24%、49%。西方吸漬(western blot)分析顯示，重組質體轉移細胞所表現的突變的IDUA蛋白質，在IDUA多株抗體偵測的底限之下。本實驗結果顯示，此病人在表現子9的缺失及插入突變，影響IDUA酵素活性，造成患者臨床上嚴重的性狀。