Browsing by Author "Yeh, Chia-Tsui"

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    禽類IgY抗體在新冠病毒之保護、預防與檢測研究
    (2023) 葉嘉翠; Yeh, Chia-Tsui
    因應對生物醫學研究的需求，實驗動物的福祉及符合動物實驗3R的要求日益提升。過去以小鼠、兔子、山羊、牛、馬…等傳統動物模式來產製多株抗體的方式，將被嚴格的監督、要求與限制。所以尋找取代動物抗體產製的新方法及動物模式，成為一個非常重要的課題。蛋黃免疫球蛋白（yolk immunoglobulins，IgY），是卵黃中唯一的免疫球蛋白，以動物種源發生學的距離，哺乳類與鳥類的同源性低的優勢，可以產生具有高專一性的抗體，在某些免疫分析中，常用雞卵黃 IgY 替代哺乳類 IgG。IgY 特殊的分子結構與哺乳類免疫球蛋白略有差異，以至於不會引發有害人體的補體反應，也不會與類風濕性因子（rheumatoid factor）結合，也不會與哺乳動物的 IgG 產生交互作用（cross reaction）。只要收集免疫抗原後的雞蛋，加以純化取得卵黃中的抗體即可，不用犧牲動物或是長期侵入性的抽血取得動物血清。雞卵黃具有非侵入性、可持續高產量、飼育及純化成本低的種種優點，成為本研究中產製多株抗體的首選動物模式。本研究以抗原免疫蛋雞後，待蛋雞血清中專一性抗體濃度升高後，將蛋雞產出的雞蛋進行卵黃 IgY 抗體的純化，並進行抗體的專一性及靈敏度測試。本研究以新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）之刺突蛋白（又稱棘蛋白）（spike protein or S protein）蛋白次單元蛋白 S1、S2 誘發的 IgY 中和抗體，在 Vero E6 細胞株的感染中和力試驗中證明具有良好阻抗病毒的效果，進一步在倉鼠鼻滴定病毒感染試驗中，一次性投予抗 S 蛋白之 IgY 中和抗體，能有效降低新型冠狀病毒感染及病徵的嚴重程度。而 SARS-CoV-2 新型冠狀病毒抗N（nucleocapsid proteins；核殼蛋白）蛋白 IgY 抗體，則可專一且靈敏的於 11 株人類常見的呼吸道病毒試驗的酵素結合免疫吸附分析法（ELISA）試驗中，在 100~1000 個病毒的狀態下，檢測出 SARS-CoV-2 的病毒株。結果顯示誘發的 IgY 抗體具有高抗體效價特、專一性及中和力價。本研究亦誘發抗 SARS-CoV-2 病毒的 IgY 抗體，並且利用 IgY 抗體進行 ELISA、Western Blot、IHC、IF 等試驗的運用。總而言之，本研究證明了 IgY 抗體具有抵抗呼吸道傳染性病原的能力，可發展成具阻抗病原感染的預防和治療的中和性抗體藥品，及發展成更優良的檢測工具。