Browsing by Author "許又仁"
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Item 基質輔助雷射脫附/游離-飛行時間質譜法對神經戰劑降解產物的快速偵測(2006) 許又仁; You-Ren Shu本研究提出一個以基質輔助雷射脫附游離飛行時間質譜法作為快速對神經戰劑降解產物進行檢測與監控的方法。本研究選用五個有機磷化合物標準品當作分析物,分別為isopropyl methylphosphonic acid (IMPA)、pinacolyl methylphosphonic acid (PMPA)、ethyl methylphosphonic acid (EMPA)、isobutyl methylphosphonic acid (i-BuMPA)與cyclohexyl methylphosphonic acid (CHMPA),分別為Sarin (GB)、Soman (GD)、VX、Russian VX (RVX)與GF此五種神經戰劑的降解產物。研究中選用的基質為CHCA (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid),並結合Nd:YAG雷射的第三倍頻波355 nm進行偵測。本研究成功地利用此方法快速偵測到五種神經戰劑的降解產物,可以作為一個監控的分析方法。Item 應用單分子技術於SARS冠狀病毒核殼鞘蛋白-DNA交互作用之研究(2011) 許又仁; You-Ren HsuSARS-CoV核殼鞘蛋白(nucleocapsid protein)與其病毒RNA結合形成核殼體(ribonucleocapsid)是包裹形成病毒顆粒必要的過程。近來SARS-CoV核殼鞘蛋白的研究顯示其蛋白質的結構靠近N端與C端個別有一個具有結構的區塊(NTD與CTD),且兩者皆能與RNA與DNA結合。在這個過程涵蓋了複雜的蛋白質-核酸交互作用,以及蛋白質之間彼此的交互作用。在傳統的生物化學技術如Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)應用於研究蛋白質-核酸交互作用有其技術性的限制,難以直接性的區別CTD與NTD與核酸結合過程中所扮演的腳色的差異。 這篇論文的目標是應用單分子技術構建一個可直接觀察SARS-CoV CTD與NTD個別與單一核酸分子產生交互作用過程的實驗系統。我們透過螢光染劑YOYO-1和DNA結合並接著在經聚乙二醇(PEG)改質的玻璃上,並透過Alexa594和蛋白質結合,構築螢光影像。使得實驗過程可透過兩種螢光的受激發後放光的波長不同,在不同的濾鏡頻道下分別觀察DNA與蛋白質產生交互作用時的影像。 實驗的結果意外的發現SARS-CoV CTD在低濃度的環境下,SARS-CoV CTD會產生聚合(Aggregation)的現象,使得少量SARS-CoV CTD以Oligomer形式存在;而SARS-CoV NTD在相同的濃度條件卻並不產生聚合的現象。而在蛋白質與核酸交互作用的實驗當中,我們觀測到SARS-CoV CTD與DNA之間的親和力(affinity)大於SARS-CoV NTD與DNA之間的親和力與相關文獻的EMSA結果一致。透過此實驗系統的建構,可進一步應用於了解核殼鞘蛋白(NP)-RNA交互作用與SARS-CoV RNA的包裹機制。