Browsing by Author "羅子雅"

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    新生期投予地塞米松對於成年雌性大鼠 海馬迴 G 蛋白偶合雌激素受體之影響
    (2019) 羅子雅; Lo, Tsz-Nga
    地塞米松（dexamethasone, DEX）是一種合成的糖皮質激素，通常用作消炎藥物。它亦被廣泛用於早產兒身上（prematurely born infant），以治療早產嬰兒的慢性肺部疾病（chronic lung disease)。新生期投予地塞米松治療（neonatal dexamethasone treatment, NDT）已被廣泛研究並證明對中樞神經系統具有長期的不良反應。我們先前的研究結果顯示，新生期投予地塞米松治療（neonatal dexamethasone treatment, NDT）對於成年雄性和青春期雌性大鼠均引起類憂鬱行為（depression-like behavior）的顯著增加。然而，新生期投予地塞米松治療，對成年雌性大鼠的長期影響仍有待探討。除了傳統的alpha （ER）和beta（ER） 型雌激素受體外，G蛋白偶合雌激素受體（G protein-coupled estrogen receptor, GPER舊稱為GPR30）亦廣泛分佈於生殖系統、心血管系統和腦組織中，尤其是在海馬迴（hippocampus）中有大量表現。前人的研究發現GPER是一種位於細胞膜上的雌激素受體，在乳腺、血管內皮細胞及生殖系統相關癌症中呈現異常的表現及作用。然而，對於GPER的神經作用，特別是對行為的影響及作用機制仍待探究。GPER是否會影響海馬迴長期增益效應（long-term potentiation, LTP）的形成？以及杏仁核（amygdala）是否會受到NDT影響？還有待進一步研究。本研究之主旨在為探討GPER是否參與NDT對雌性大鼠產生的長期不良影響。 在此研究中，出生第1天至第3天（postnatal day 1 to 3）對雌性幼鼠以皮下注射方式（subcutaneous injection）投予遞減劑量（0.5, 0.3,& 0.1 mg/kg）的DEX。爾後於10週齡時進行一系列的行為、生化以及電生理實驗。例如以強迫游泳實驗（forced swim test, FST）和蔗糖糖水偏好實驗 （sucrose preference test, SPT） 來評估NDT所誘發的類憂鬱行為。此外使用開放空間測試（open field test, OFT）來評估DEX的非專一效應 (non-specific effect)。為了防止行為實驗對生化分析所造成之干擾，我們以相同的方式準備了另外一批動物，於十週齡時斷頭犧牲，取出其海馬迴進行即時定量聚合酶連鎖反應（real-time polymerase chain reaction, qPCR）分析ERα、ERβ和GPER的表現。部分動物則用於離體胞外電生理記錄實驗 (in vitro extracellular recording)，以檢測海馬迴腦切片中，由高頻電刺激（high-frequency stimulation, HFS）所誘發的長期增益效應（long-term potentiation, LTP），並以直接灌流方式（suprafusion）投予GPER的選擇性致效劑 （selective agonist） G1，評估G1是否能挽回海馬迴中的LTP。再以直接灌流方式（suprafusion）投予GPER的選擇性拮抗劑 （selective antagonist） G15，評估G15是否能阻斷G1所挽回海馬迴中的LTP。 實驗結果顯示，NDT雌鼠在FST中的不動的時間百分比(percent time of immobilization) 明顯增加，而SPT的結果亦顯示其蔗糖偏好指數(sucrose preference index)明顯降低，但NDT與控制組在OPT中的水平運動距離(total horizontal moving distance)並無明顯差異，此項結果顯示NDT成年雌性大鼠的類憂鬱行為增加，應與DEX的非專一效應對活動能力之干擾無關。在qPCR的結果顯示，青少年期時雌性NDT大鼠海馬迴中ER、ER和GPER的表現量，與控制組相比並無明顯差異。然而，在成年期NDT雌性大鼠的海馬迴中GPER的表現量則明顯減少。離體胞外電生理記錄的結果顯示，成年期NDT雌性大鼠海馬迴中，HFS-LTP的強度顯著降低，而在表面灌流GPER的選擇性致效劑G1後，NDT雌鼠海馬迴之LTP可恢復至正常水平，並且在表面灌流GPER的選擇性拮抗劑G15後G1的拯救效果被完全阻斷。 總結各項實驗結果，GPER在NDT對海馬迴中LTP之異常表現中，扮演了十分重要的角色。後續的研究可針對G1是否亦能對NDT所引發的行為異常，具有治療效果進行進一步的探討。利用藥第投予恢復海馬迴中GPER的表現量，或是利用GPER的選擇性致效劑，極可能對NDT所造成之行為異常，具有治療的效果，未來可朝此二個方向進行藥物研發。 關鍵詞: 地塞米松、海馬迴、G 蛋白偶合雌激素受體、長期增益效應