Browsing by Author "張紘綸"

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    建立海藻糖合成酶之高效率純化暨活性篩選系統
    (2010) 張紘綸
    海藻糖（trehalose）為兩個葡萄糖以α1-1鍵結形成的非還原性雙糖，存在於許多生物體當中，可以作為能量的儲存形式，在脫水等逆境時穩定蛋白質和生物膜的結構，保護細胞免於環境壓力。在食品、化妝、醫藥業上都有廣泛的應用。海藻糖合成酶（trehalose synthase、TreS）為催化麥芽糖分子內鍵結轉化成海藻糖的酵素，並產生副產物葡萄糖，為海藻糖的生合成路徑之一。因為是單一酵素反應，在應用上易於控制流程，且原物料便宜與穩定，在生產海藻糖上有很大的潛力。傳統海藻糖合成酶活性測定的方式有HPLC與海藻糖水解酶（trehalase）呈色法，但這兩種方式有費時、費用昂貴與測定標的物專一性等問題，無法快速大量分析不同活性之TreS。本實驗建立了一套新的微量盤式麥芽糖水解酶（maltase）呈色法來進行大量且快速的活性分析。本法在TreS活性測定上更有效率，準確度高且不會有專一性不足的問題，適用於大量TreS樣品的分析。未來在TreS的蛋白質工程上，如定向演化上可以對大量的突變TreS進行活性篩選，來挑選出高轉化率或是高熱穩定性的突變TreS。